 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 5 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 1026 | 回復(fù): 8 | ||
| 當(dāng)前只顯示滿足指定條件的回帖，點(diǎn)擊這里查看本話題的所有回帖 | ||
王憶楠yn新蟲 (小有名氣)
|
[求助]
pcr反應(yīng)cytb序列擴(kuò)不出原因？求分析！ 已有2人參與
|
|
|
本人本科生，目前做書虱的種內(nèi)鑒定。之前用引物擴(kuò)增ITS序列，電泳出現(xiàn)條帶，但是送去公司檢測(cè)，說亮帶里有比較亂，無法測(cè)序�，F(xiàn)在用引物擴(kuò)增cytb序列，發(fā)現(xiàn)沒有條帶。 試劑 ddh2o 31.5ul dNTP 4ul buffer(Mg2+) 5ul 引物1 1.5ul 4個(gè)ep管分裝 每個(gè)ep12.5ul 引物2 1.5ul taq酶 0.5ul 模板 6ul （之前老師也做過幾次，同樣沒有條帶）退火溫度為40.0 41.2 43.9 47.7 52.6 56.5 58.8 60.0“℃。 模板有一年了，但是its 有條帶，很亮，只是無法測(cè)序。用新的模板可以擴(kuò)出很亮的條帶（cytb）。想求助是不是模板的問題. cytb: F TATGTACTACCATGAGGACAAATAT R ATTACACCTCCTAATTATTAGGAAT |
回復(fù)此樓» 猜你喜歡
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之小鼠實(shí)驗(yàn)：嚴(yán)謹(jǐn)設(shè)計(jì)，解析生命機(jī)制的重要載體
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之重金屬檢測(cè)：精準(zhǔn)篩查，守護(hù)健康與環(huán)境的防線
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
化學(xué)工程及工業(yè)化學(xué)論文潤(rùn)色/翻譯怎么收費(fèi)?
已經(jīng)有66人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之“蛙測(cè)重金屬我背鍋三千”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之“鼠逃三次我發(fā)三篇SCI”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
納米粒度分析
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
林科院林化所招收材料與化工專業(yè)碩士，坐標(biāo)南京
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
留學(xué)--博士招生
已經(jīng)有16人回復(fù)
-
化學(xué)工程，本211，求調(diào)劑，ab區(qū)不限
已經(jīng)有4人回復(fù)
-
邵陽學(xué)院食品與化學(xué)工程學(xué)院碩士調(diào)劑
已經(jīng)有0人回復(fù)
» 本主題相關(guān)商家推薦: (我也要在這里推廣)
» 本主題相關(guān)價(jià)值貼推薦，對(duì)您同樣有幫助:
- 菌液提不出質(zhì)粒來，求幫分析。
已經(jīng)有4人回復(fù)
- 請(qǐng)問從文獻(xiàn)中查到了引物序列，但不知道PCR反應(yīng)條件，應(yīng)該用什么軟件
已經(jīng)有4人回復(fù)
- PCR瓊脂糖凝膠電泳圖希望大家?guī)臀曳治鲆幌?/a>
已經(jīng)有12人回復(fù)
- QPCR產(chǎn)物跑膠問題
已經(jīng)有10人回復(fù)
- 做病毒檢測(cè)，PCR跑膠500bp處總是有條帶
已經(jīng)有4人回復(fù)
- SDS-PAGE結(jié)果求分析原因
已經(jīng)有23人回復(fù)
- 求助，關(guān)于pcr擴(kuò)增后產(chǎn)物序列在ncbi上的比對(duì)，以及3' race接頭引物的設(shè)計(jì)。。
已經(jīng)有6人回復(fù)
- WB條帶全出來了· ----各種條帶··求分析
已經(jīng)有12人回復(fù)
- 【求助】用cDNA的ORF序列以基因組DNA為模板 做PCR 為何P不出其對(duì)應(yīng)的基因組序列?
已經(jīng)有8人回復(fù)
- 為什么我的AOA的amoA基因擴(kuò)增不亮
已經(jīng)有8人回復(fù)
- 根據(jù)已知序列，從相同菌種(菌株編號(hào)不同)中能PCR出目的基因嗎？
已經(jīng)有6人回復(fù)
- 真菌ITS序列PCR擴(kuò)增 求助
已經(jīng)有9人回復(fù)
- 求助！PCR擴(kuò)增不出全長(zhǎng)DNA序列怎么辦？
已經(jīng)有24人回復(fù)
- 【求助/交流】問個(gè)問題,測(cè)PCR產(chǎn)物序列的時(shí)候會(huì)不會(huì)測(cè)出引物的序列?
已經(jīng)有16人回復(fù)
sh_9153
銀蟲 (小有名氣)
- 應(yīng)助: 19 (小學(xué)生)
- 金幣: 1013.4
- 紅花: 1
- 帖子: 56
- 在線: 32.3小時(shí)
- 蟲號(hào): 1622855
- 注冊(cè): 2012-02-17
- 性別: GG
- 專業(yè): 微生物生理與生物化學(xué)
【答案】應(yīng)助回帖
★ ★ ★
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
西門吹雪170: 金幣+3, 鼓勵(lì)回帖交流 2015-04-11 22:09:26
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
西門吹雪170: 金幣+3, 鼓勵(lì)回帖交流 2015-04-11 22:09:26
|
條帶暗有可能是你引物問題，錯(cuò)配率高，由于你用其它模板可以擴(kuò)出目的條帶，證明引物自身沒有問題，只有可能是引物和模板結(jié)合問題，或者是模板本身問題 1.嘗試再一次降低退火溫度，看是否能擴(kuò)出來 2.重新設(shè)計(jì)引物，或者增加引物長(zhǎng)度，提高引物特異性 3.認(rèn)真檢測(cè)一下模板，確定模板沒有問題 |
王憶楠yn7樓2015-04-10 16:26:40
lomis
木蟲 (正式寫手)
- 應(yīng)助: 43 (小學(xué)生)
- 金幣: 1766.8
- 散金: 420
- 紅花: 25
- 帖子: 896
- 在線: 369.2小時(shí)
- 蟲號(hào): 1884761
- 注冊(cè): 2012-07-09
- 性別: GG
- 專業(yè): 生物材料
2樓2015-04-10 09:04:46
王憶楠yn
新蟲 (小有名氣)
- 應(yīng)助: 1 (幼兒園)
- 金幣: 255.8
- 散金: 20
- 帖子: 143
- 在線: 57.4小時(shí)
- 蟲號(hào): 3460539
- 注冊(cè): 2014-10-08
3樓2015-04-10 09:20:23
lomis
木蟲 (正式寫手)
- 應(yīng)助: 43 (小學(xué)生)
- 金幣: 1766.8
- 散金: 420
- 紅花: 25
- 帖子: 896
- 在線: 369.2小時(shí)
- 蟲號(hào): 1884761
- 注冊(cè): 2012-07-09
- 性別: GG
- 專業(yè): 生物材料
4樓2015-04-10 09:22:43
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 調(diào)劑310 +6 | 溫柔的晚安 2026-03-25 | 7/350 |
|
|---|---|---|---|---|
|
[考研]
 一志愿武漢理工，總分321，英一數(shù)二，求老師收留。
+6
|
nnnnnnn5 2026-03-25 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 317求調(diào)劑 +6 | 十閑wx 2026-03-24 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 求調(diào)劑 +6 | 蘆lty 2026-03-25 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 一志愿南京航空航天大學(xué)材料學(xué)碩求調(diào)劑 +3 | @taotao 2026-03-28 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 一志愿南昌大學(xué)324求調(diào)劑 +7 | hanamiko 2026-03-27 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 081200-314 +3 | LILIQQ 2026-03-27 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 265求調(diào)劑11408 +3 | 劉小鹿lu 2026-03-27 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 085600材料與化工調(diào)劑 +10 | A-哆啦Z夢(mèng) 2026-03-23 | 16/800 |
|
|
|
[考研] 08開頭275求調(diào)劑 +4 | 拉誰不重要 2026-03-26 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 324求調(diào)劑 +8 | hanamiko 2026-03-26 | 10/500 |
|
|
|
[考研] 尋找調(diào)劑 +5 | 倔強(qiáng)芒? 2026-03-21 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 考研調(diào)劑 +6 | 來好運(yùn)來來來 2026-03-21 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 生物技術(shù)與工程 +3 | 1294608413 2026-03-25 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 080500求調(diào)劑 +3 | zzzzfan 2026-03-24 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 求調(diào)劑一志愿武漢理工大學(xué)材料工程（085601） +5 | WW.' 2026-03-23 | 7/350 |
|
|
|
[考博] 26申博自薦 +3 | whh869393 2026-03-24 | 3/150 |
|
|
|
[基金申請(qǐng)] 請(qǐng)教下大家 2026年國(guó)家基金申請(qǐng)是雙盲審嗎？ +3 | lishucheng1 2026-03-22 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 石河子大學(xué)（211、雙一流）碩博研究生長(zhǎng)期招生公告 +3 | 李子目 2026-03-22 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 求調(diào)劑 +5 | Zhangbod 2026-03-21 | 7/350 |
|