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xuelvsnow新蟲 (小有名氣)
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[求助]
大家好，我想請(qǐng)教一下反相HPLC分析蛋白樣品時(shí)，前處理應(yīng)該怎能做 已有5人參與
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我之前用過C18，C8 流動(dòng)相是 A：水 0.1%三氟乙酸 B：乙腈或甲醇 0.085%三氟乙酸 上樣是20ul， 今天發(fā)現(xiàn) 我的樣品在B液中析出大量沉淀 這樣會(huì)不會(huì)對(duì)我的柱子有影響啊，因?yàn)槲野l(fā)現(xiàn)上樣次數(shù)多了，檢測(cè)出的峰偏低 偏少了，甚至沒有什么峰了。 我的樣品前處理是：將1g樣品 溶于10ml PH7.0的50mMPBS中 超速離心取上清。 我想知道，如果我的樣品在有機(jī)相中沉淀，是不是前處理的問題，如有是的話應(yīng)該怎么辦呢；還是需要調(diào)節(jié)有機(jī)相��？ 圖片中分別是 水；乙腈；甲醇；乙醇；異丙醇；(純的) 100-200ul樣品 +1mL溶劑 離心后的效果 非常感謝大家的幫助!   IMG_0589.JPG |
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禁蟲 (職業(yè)作家)
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【答案】應(yīng)助回帖
★ ★ ★ ★ ★
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
xuelvsnow: 金幣+5, ★★★很有幫助, O(∩_∩)O謝謝你的文獻(xiàn)，給了我些思路。 2015-05-16 14:45:41
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
xuelvsnow: 金幣+5, ★★★很有幫助, O(∩_∩)O謝謝你的文獻(xiàn)，給了我些思路。 2015-05-16 14:45:41
| TFA、甲醇、乙腈隨便一個(gè)都能使蛋白沉淀。我建議你查查文獻(xiàn)。這里給你找了一篇供參考。 |
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2015-05-15 11:41:49, 62.59 K
4樓2015-05-15 11:41:50
青雅
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2樓2015-05-14 23:02:47
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3樓2015-05-15 08:51:48
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5樓2015-05-15 11:55:41
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