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15150681606

銀蟲(chóng) (小有名氣)

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[求助] western blot 求助��！已有1人參與

我們要測(cè)capase-3活性，買(mǎi)的caspase-3試劑盒自帶裂解液。打算直接用自帶的裂解液做小鼠心臟勻漿。但剩余的組織勻漿希望做WB，所以我想在勻漿時(shí)加PMSF，但是問(wèn)了商家說(shuō)不建議我加PMSF。
“對(duì)于caspase 3活性檢測(cè)不建議加入PMSF，使用試劑盒裂解得到的樣品可以用于Western檢測(cè)，但是對(duì)于一些較難裂解得到的蛋白可能不太適用。 ”-他說(shuō)
但是不加PMSF我覺(jué)得很難做出理想的結(jié)果，所以感覺(jué)很為難！
各位有什么好的建議么？

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1樓 2015-06-10 16:22:06

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緋紅誓言

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★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
15150681606: 金幣+8, ★★★很有幫助, 感謝幫助，謝謝交流。 2015-06-23 14:15:33

PMSF 苯甲基磺酰氟它的靶蛋白酶是胰凝乳蛋白酶和胰蛋白酶，我認(rèn)為PMSF是可以抑制大部分的蛋白酶，但是對(duì)于靶蛋白酶的抑制是最主要的。而capase-3是32kD的半胱氨酸蛋白酶，為了減少PMSF對(duì)試驗(yàn)結(jié)果的干擾，我建議不要加。

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回復(fù)此樓

3樓2015-06-16 23:58:49

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15150681606

銀蟲(chóng) (小有名氣)

2樓2015-06-12 14:07:41

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