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蛋白質(zhì)純化問題 已有3人參與
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現(xiàn)在目前遇到的問題： 1，超濾過程中蛋白質(zhì)的去除率能夠達(dá)到多少，有篇文獻(xiàn)上，題名“Simplified purification of equine chorionic gonadotropin (eCG) – an example of the use of magnetic microsorbents for the isolation of glycoproteins from serum”表2中，達(dá)到了98% 2.不知道這種酸性蛋白能不能用陽離子交換樹脂進行純化，可是真的有發(fā)現(xiàn)，文獻(xiàn)比我的蛋白等電點p低的ecg用了陽離子交換樹脂，“題名”Extraction of Equine Chorionic Gonadotrophin from Pregnant Mare Plasma by Direct Adsorption on Chromatographic Media“。 3，離子交換介質(zhì)的上樣緩沖液，假如是乙酸鈉緩沖液，那洗脫的時候能否使磷酸鹽緩沖液。 4，由于活性的測定過程比較麻煩，費錢費力，所以不能更多的嘗試方法。 |
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冼亮淀粉酶
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生物大分子降解酶
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【答案】應(yīng)助回帖
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bao可雅: 金幣+5 2015-07-06 09:49:25
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一步法就能夠純化蛋白質(zhì)是很難的，除非親和層析。對于你的蛋白質(zhì)到底能達(dá)到什么效果，還得自己來做才知道。我遇到最極端的情況就是，文獻(xiàn)上達(dá)到一步純化，但自己完全做不出來。 等電點在酸性的蛋白質(zhì)如果用陰離子交換柱層析應(yīng)該是都能吸附上的，至于是不是用陽離子交換，只要是要看這個蛋白質(zhì)的pH穩(wěn)定范圍。 洗脫的時候我的習(xí)慣用法是用同樣的緩沖液。 |
4樓2015-06-16 21:53:07
冼亮淀粉酶
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7樓2015-06-16 23:39:33
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