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小葉子92鐵蟲 (初入文壇)
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[求助]
求助做過miRNA功能分析的大神們，如何對(duì)一個(gè)未知功能的新的miRNA進(jìn)行分析？
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額。。剛?cè)腴T的小白，我要做的是昆蟲中的miR-927a，但是查了之后發(fā)現(xiàn)沒有人做過功能研究，在其他物種中也沒有人做過，沒法參考。。像這種miRNA,我該如何著手做呢？ 我現(xiàn)在有一個(gè)大致的步驟：1 對(duì)這個(gè)miRNA進(jìn)行靶基因預(yù)測(cè)， 2 進(jìn)行qrt-PCR分析miRNA表達(dá)量， 3 進(jìn)行靶基因3‘UTR熒光素酶告基因的檢測(cè) 我現(xiàn)在的問題是：我要做的是對(duì)miRNA 的功能進(jìn)行驗(yàn)證，是否需要進(jìn)行miRNA mimics或inhibitor的處理？ 如果需要這一步的話是在熒光素酶檢測(cè)之前還是之后？但是用模擬物處理的話好像還需要知道作用的靶基因才行，如果需要知道靶基因的功能，是否需要進(jìn)行GO通路分析? 現(xiàn)在最大的問題就是是否需要進(jìn)行GO通路分析來確定靶基因，還有就是希望能幫我看看我的步驟是否需要完善. 謝謝大家�。�！ |
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