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提取質(zhì)粒和搖菌時(shí)候的問(wèn)題。。。。。。。。。。 已有4人參與
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目的基因與表達(dá)載體連接后，挑取單菌落pcr鑒定正確，然后提取質(zhì)粒酶切鑒定，但是菌液過(guò)夜培養(yǎng)一直不夠渾濁（3ml接入400ul菌液），提取的質(zhì)粒也不亮，酶切鑒定過(guò)一次，單雙酶切結(jié)果一樣，都是一條帶，大小一樣，我又將同管菌液，質(zhì)粒PCR鑒定，目的條帶也正確，不知道到底是什么原因？？？？？？哪位知道，跪求指點(diǎn)！ |
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Ailly950
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9樓2015-07-25 09:45:23
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2樓2015-07-24 09:34:24
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3樓2015-07-24 11:20:56
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【答案】應(yīng)助回帖
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感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
myprayer: 金幣+1, 贈(zèng)人玫瑰，手有余香，分子生物期待您更多精彩。 2015-07-25 20:00:28
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| 就像3樓的建議，可以擴(kuò)大培養(yǎng)試試，以前我也遇到過(guò)菌搖不起來(lái)，經(jīng)常要16個(gè)小時(shí)才有渾濁，提取質(zhì)粒濃度低，我的原因是因?yàn)槲业穆《举|(zhì)粒太大了，將近1萬(wàn)bp，所以有人說(shuō)質(zhì)粒太大，菌就不好搖，后來(lái)擴(kuò)大培養(yǎng)，做大提質(zhì)粒，質(zhì)粒濃度和純度都還挺好的，不知道你的情況是不是和我一樣 |
4樓2015-07-24 15:35:22
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