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sdjnyxn123銀蟲 (小有名氣)
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[求助]
請問為什么測序對了的重組質粒，雙酶能切出其他條帶 已有4人參與
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做表達做了快一年了一直沒有表達出來，心里快急死了··· 是一個pet30與目的基因的重組質粒，目的基因117bp，總共只有11kDa大小的氨基酸，嘗試了多次誘導表達都不成功 測序沒有問題（只測了T7啟動子后的序列，加上插入的目的基因序列，跟給出的pet30序列圖是完全相同的，翻譯成氨基酸理論上也可以正常表達） 目前在找問題，發(fā)現(xiàn)酶切這個地方一直有問題沒有解決 這個是提取的質粒的照片 之后將此質粒轉化入其他BL21和DH5a，測序也都正確； 這個是將此質粒進行雙酶切的電泳照片 請問為什么在1000多和3000多的地方也有條帶呢？ 按理說商業(yè)質粒不應該會有其他部位能切開的吧？請問這是什么原因呢？ |
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