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藥代動(dòng)力學(xué)中提取回收率低的問題 已有2人參與
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請(qǐng)教各位大俠,我做一個(gè)中藥兩個(gè)成分的藥代動(dòng)力學(xué), 方法為2倍量甲醇直接沉淀蛋白,上清液吹干,復(fù)溶。 回收率做法:吸相應(yīng)高中低濃度的標(biāo)準(zhǔn)品溶液吹干,加200ul空白血漿,在按血漿處理辦法處理,記錄峰面積A1。洗相應(yīng)高中低標(biāo)準(zhǔn)品溶液吹干,定容至相應(yīng)濃度,記錄峰面積A2。所得回收率=A1/A2,值在70%~76%之間,文獻(xiàn)報(bào)道為90%以上。而且質(zhì)控樣品每個(gè)濃度平行的五份中每份的峰面積有所差異,標(biāo)準(zhǔn)曲線做出來(lái)也很丑,不能達(dá)到要求。 我想請(qǐng)教各位在做質(zhì)控樣品時(shí),取相應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)品溶液吹干后,是直接加空白血漿混勻呢,還是先加甲醇混勻后在加空白血漿好(我所測(cè)兩成分不溶于水)。這種回收率是不是證明方法有問題啊,還是操作不當(dāng)。跪求各位大俠指導(dǎo)。謝謝 |
新蟲 (初入文壇)
銀蟲 (小有名氣)
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直接用甲醇沉淀的方法,70~76%我覺得已經(jīng)是可接受的范圍了,個(gè)人覺得在能測(cè)到的前提下,提取回收率達(dá)不到90%也無(wú)所謂,只要低中高濃度下它的回收率比較平穩(wěn)就可以。 如果覺得回收率低,可以考慮用其他方法,如極性比較小的話考慮用乙酸乙酯萃取,也可以加入少量甲醇后用乙酸乙酯萃取,也可以用其他二元試劑。如果化合物熱或光不穩(wěn)定,那就要低溫、避光處理或甲醇一步沉淀法,也可以考慮加入一些酸進(jìn)行保護(hù)。 還有提取回收率做法與我常用的方法有區(qū)別:我是往空白血漿中加入不同濃度標(biāo)準(zhǔn)品溶液,然后按樣品處理;另一份是空白血漿吹干后加相應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)品溶液復(fù)溶。 |
木蟲 (著名寫手)
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