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六號風(fēng)新蟲 (初入文壇)
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[求助]
用cDNA做PCR擴(kuò)增不出來。 已有3人參與
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我是一名大二本科生，前兩天剛開始用小木蟲。想要克隆玉米的一個基因，然后把它轉(zhuǎn)到擬南芥中表達(dá)，該基因的cDNA上游GC含量超高，做PCR擴(kuò)增不出來。 請問各位大佬可以用玉米的DNA做PCR嗎？擴(kuò)出來的序列含內(nèi)含子對表達(dá)會有影響嗎? 還請大佬解釋一下PCR時用cDNA和DNA做模板，兩者有什么區(qū)別? @biostar2009 @飛約瘋?cè)嗽?/u> @wizardfan @youlinglyw 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
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六號風(fēng)(西門吹雪170代發(fā)): 金幣+1, 鼓勵回帖交流 2017-05-05 08:45:41
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dna一定不行。。異源表達(dá)未必能準(zhǔn)確切除內(nèi)含子，并且也會影響目的基因的表達(dá)及其原本的功能。。說回來，擬南芥中表達(dá)也不一定能準(zhǔn)確展現(xiàn)目的基因功能。。 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
12樓2017-05-04 21:07:50
13樓2017-05-04 21:08:40
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擬南芥是模式植物，用擬南芥就是考慮了周期及操作問題。。主要看你那是一個什么基因，打個比方，如果是促進(jìn)纖維化 抗倒伏的基因，那在擬南芥中可能不易觀察表型。。所以擬南芥適不適合還是要看那是一個什么基因。。 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
15樓2017-05-05 17:55:05
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8樓2017-05-03 16:46:06
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