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[求助]
DNA含量多少才能在瓊脂糖凝膠上顯示出亮帶
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想問下各位大蝦,DNA要上多少量才能在瓊脂糖上顯示出亮帶啊?磎arker中最亮的750bp的dna50ng就很亮了,可是我的總dna用核酸測定儀測出來是110ng/ul,傷了5ul有550ng怎么跑電泳都沒見到亮帶呢,想問下有哪些因素會影響亮帶的顯現(xiàn),另外做過的一般上了多少含量的dna呢,希望各位有經(jīng)驗的大蝦指點啊,感激不盡 |
銅蟲 (著名寫手)
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1、核酸檢測儀既可以檢測DNA也可以檢測RNA,不知道樓主的DNA有沒有用RNA酶消化吶? 2、一般電泳時,還會加loading dye 并且用量比較隨意(嚴格來看,似乎要求DNA 5 ul:1 ul loading dye),所以電泳跑膠只能大概估計濃度,不知道樓主有么有考慮這點? 3、我們這邊用得3K的marker,1、3、5k為亮條帶,貌似認為是10ng/ul的量(這個一時也記不太清),所以應(yīng)該不用太高的濃度就可以看見的,樓主還是看看電泳以前的步驟有么有問題吧 |
鐵桿木蟲 (職業(yè)作家)
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