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liuwei0824新蟲 (初入文壇)
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[求助]
關(guān)于平末端連接 已有3人參與
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大家好!我最近在做平末端連接的實驗,總是做不成功,求教~~ 載體是用smal1酶切的平末端,片段是雙酶切的粘性末端,酶切后,載體進(jìn)行去磷酸化,片段進(jìn)行末端補平,然后進(jìn)行連接反應(yīng)(16℃過夜),然后轉(zhuǎn)化,平板上都不長菌。。。。 一開始載體是在30度酶切2h,片段在37度酶切2h,跑電泳后發(fā)現(xiàn),載體只是部分被切開了,然后酶切時間就改成了過夜,結(jié)果都切沒了,,, 所有的酶都用的是Takara公司的。 求高人指點啊。。≈x謝啦O(∩_∩)O~ |
新蟲 (小有名氣)

木蟲 (正式寫手)
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