 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 2 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 1140 | 回復(fù): 1 | ||
[求助]
想問(wèn)一下關(guān)于用pET-32a載體表達(dá)小片段蛋白
|
|
我現(xiàn)在想用pET-32A表達(dá)兩個(gè)多肽，一個(gè)81aa一個(gè)50aa的�？戳税胩炷莻�(gè)圖譜，有很多標(biāo)簽可以選擇，我有個(gè)疑問(wèn)是我想在想用Xba I 和EcoR I。但是這樣在圖譜上面，我切完以后rbs區(qū)沒(méi)了并且只留下最后面那個(gè)his-tag。 是否這樣我不應(yīng)該在片段基因上設(shè)計(jì)終止子，直接用histag后面那個(gè)。然后表達(dá)出來(lái)的就是可以鎳柱純化的？ 另外我切掉了rbs區(qū)，并且開(kāi)頭里lac operator很近。自身帶有TAG這樣可行么 附件有pET-32a圖譜。。望使用的人解答一下~~ |
回復(fù)此樓» 本帖附件資源列表
-
歡迎監(jiān)督和反饋：小木蟲(chóng)僅提供交流平臺(tái)，不對(duì)該內(nèi)容負(fù)責(zé)。
本內(nèi)容由用戶自主發(fā)布，如果其內(nèi)容涉及到知識(shí)產(chǎn)權(quán)問(wèn)題，其責(zé)任在于用戶本人，如對(duì)版權(quán)有異議，請(qǐng)聯(lián)系郵箱：xiaomuchong@tal.com - 附件 1 : pET32a圖譜.pdf
2013-05-08 11:38:31, 37.03 K
» 猜你喜歡
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)中的趣事：實(shí)驗(yàn)器材的 “烏龍”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)中的趣事：和實(shí)驗(yàn)材料的 “斗智斗勇”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
化學(xué)工程及工業(yè)化學(xué)論文潤(rùn)色/翻譯怎么收費(fèi)?
已經(jīng)有293人回復(fù)
-
蛋白質(zhì)檢測(cè)：精準(zhǔn)分析，解鎖生物分子的密碼
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之小鼠實(shí)驗(yàn)：嚴(yán)謹(jǐn)設(shè)計(jì)，解析生命機(jī)制的重要載體
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之重金屬檢測(cè)：精準(zhǔn)篩查，守護(hù)健康與環(huán)境的防線
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之“蛙測(cè)重金屬我背鍋三千”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之“鼠逃三次我發(fā)三篇SCI”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
納米粒度分析
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
林科院林化所招收材料與化工專(zhuān)業(yè)碩士，坐標(biāo)南京
已經(jīng)有0人回復(fù)
» 本主題相關(guān)價(jià)值貼推薦，對(duì)您同樣有幫助:
- pET28a載體蛋白表達(dá)為包涵體
已經(jīng)有5人回復(fù)
- 關(guān)于pET32a的HIS標(biāo)簽
已經(jīng)有10人回復(fù)
- 小片段基因文庫(kù)構(gòu)建中載體的選擇
已經(jīng)有15人回復(fù)
- 請(qǐng)問(wèn)pET30b這個(gè)載體在IPTG誘導(dǎo)后有沒(méi)有可能表達(dá)除了目的蛋白以外的其他蛋白？
已經(jīng)有16人回復(fù)
- 做原核表達(dá)引物設(shè)計(jì)的有關(guān)問(wèn)題
已經(jīng)有14人回復(fù)
- 雙酶切后載體片段變小
已經(jīng)有8人回復(fù)
- PET-32a雙酶切無(wú)法回收
已經(jīng)有8人回復(fù)
- pEASY-E1使用中出現(xiàn)的問(wèn)題
已經(jīng)有9人回復(fù)
- 求助：重組質(zhì)粒酶切問(wèn)題！請(qǐng)大家?guī)臀医鉀Q一下，急！
已經(jīng)有7人回復(fù)
- 原核表達(dá) pET32a和pET30a Western blot問(wèn)題
已經(jīng)有9人回復(fù)
- 十萬(wàn)火急，重組質(zhì)粒酶切只有一條帶，測(cè)序有結(jié)果，但反復(fù)說(shuō)我質(zhì)粒濃度很低
已經(jīng)有16人回復(fù)
- Amp、IPTG和X-gal的使用
已經(jīng)有12人回復(fù)
- 原核表達(dá) PET-30載體 目的蛋白分子量偏��？
已經(jīng)有18人回復(fù)
- 用過(guò)pET28a(+)表達(dá)載體的高人請(qǐng)指教
已經(jīng)有31人回復(fù)
- 含信號(hào)肽的序列能否在原核表達(dá)系統(tǒng)PET-32a中表達(dá)
已經(jīng)有7人回復(fù)
- 已經(jīng)帶his標(biāo)簽?zāi)康牡鞍谆蛉绾卧O(shè)計(jì)引物�。康幕蛞呀�(jīng)接在pET-22b的載體上了）
已經(jīng)有8人回復(fù)
- 我用的是pMAL-m2載體，片段大小連不上！
已經(jīng)有3人回復(fù)
- 【求助/交流】關(guān)于PEt-28a質(zhì)粒載體表達(dá)蛋白質(zhì)的問(wèn)題
已經(jīng)有9人回復(fù)
- 【求助/交流】那位有載體PET32a的圖譜
已經(jīng)有5人回復(fù)
- 【求助/交流】連接表達(dá)載體PET-28A失敗原因
已經(jīng)有23人回復(fù)
Haibara_Ai
銅蟲(chóng) (小有名氣)
- 應(yīng)助: 57 (初中生)
- 金幣: 1896.7
- 紅花: 3
- 帖子: 262
- 在線: 306.9小時(shí)
- 蟲(chóng)號(hào): 2222431
- 注冊(cè): 2013-01-05
【答案】應(yīng)助回帖
★ ★
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
xjtu0025: 金幣+1, ★有幫助 2013-05-08 22:19:19
gyesang: 金幣+1, 鼓勵(lì)回帖應(yīng)助！ 2013-05-08 22:58:19
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
xjtu0025: 金幣+1, ★有幫助 2013-05-08 22:19:19
gyesang: 金幣+1, 鼓勵(lì)回帖應(yīng)助！ 2013-05-08 22:58:19
|
沒(méi)有rbs當(dāng)然不行，當(dāng)然你可以克隆一個(gè)rbs進(jìn)來(lái) 另外atg和rbs的距離變化也不能太大 6/7是比較安全的，同RNA兩個(gè)短肽第二個(gè)rbs之前最好加一個(gè)insulator，這樣才能確保穩(wěn)定表達(dá)。 |
2樓2013-05-08 21:07:34
相關(guān)版塊跳轉(zhuǎn)
我要訂閱樓主 xjtu0025 的主題更新
| 2 | 1/1 | 返回列表 |
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
