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大臉貓貓喵金蟲 (初入文壇)
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[求助]
NdeI,BamHI雙酶切
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| 我用NedI和BamHI雙酶切我的目的片段然后和28a連接。試著改變了多次酶切酶連條件，但一直都轉(zhuǎn)化不出來(lái)。28a切完后跑電泳與質(zhì)粒比較應(yīng)該是切開的�，F(xiàn)在不知道問(wèn)題到底是出在哪里了。求各位幫忙分析一下，可能的原因以及解決的方案吧~謝謝~~感激不盡！ |
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cookee1981
銀蟲 (初入文壇)
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【答案】應(yīng)助回帖
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gyesang: 金幣+2, 鼓勵(lì)回帖應(yīng)助！ 2013-08-15 16:47:25
gyesang: 回帖置頂 2013-08-15 16:47:37
gyesang: 很好的建議，樓主可以考慮 2013-08-15 16:53:39
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| 你的目的片段是PCR產(chǎn)物還是已經(jīng)連在了克隆載體上？如果是直接用PCR產(chǎn)物進(jìn)行酶切，可能會(huì)比較困難，而且要看你有沒(méi)有在酶切位點(diǎn)兩端加上保護(hù)堿基。如果是從克隆載體上雙酶切，那就要測(cè)序檢查一下酶切位點(diǎn)是否為唯一的在目的片段兩端。 |
4樓2013-08-15 14:48:07
gyesang
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2樓2013-08-14 18:06:44
hermain
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3樓2013-08-15 13:35:40
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5樓2013-08-15 14:54:53
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