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supermary000金蟲 (小有名氣)
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[求助]
空白流動相出現(xiàn)倒峰
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| 這兩天做實驗出現(xiàn)倒峰很是頭疼,本人用的流動相是乙腈與磷酸二氫鉀(ph3.2)兩相梯度,在進空白溶劑(磷酸二氫鉀(ph3.2):乙腈=20:80)時在樣品出峰位置出現(xiàn)倒峰,進乙腈也出現(xiàn)這種情況,但進空針、純水、磷酸二氫鉀(ph3.2)沒有問題,到底是哪里出現(xiàn)的問題,還請各位大蝦們幫幫忙吖……小妹不勝感激 |
捐助貴賓 (正式寫手)
| 樓主你進的空針、純水、磷酸二氫鉀和空白溶劑結(jié)果不同(倒峰的有無情況不同)可排除流通池污染以及檢測器的極性接反這兩種情況。那么就要從以下兩方面考慮:1.參比波長:樣品在參比波長處有吸收的話,就會出現(xiàn)倒峰。參比波長應(yīng)設(shè)在樣品沒有吸收的地方,且越靠近樣品的檢測波長越好。2.梯度洗脫程序方面:你用的流動相是乙腈與磷酸二氫鉀的梯度洗脫?梯度是什么樣的?如果梯度變化比較劇烈(在短時間內(nèi)變化的比例較大),所對應(yīng)的你所謂的“樣品出峰”時刻流動相比例可能與你的進空白溶劑比例不一致(不是20:80),那么這時就會有吸收,若此時吸收值比溶劑吸收值小,表現(xiàn)給我們的就是倒峰。(你的梯度好好考慮一下),功力尚淺,敬請指教! |


木蟲 (小有名氣)
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