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supermary000金蟲 (小有名氣)
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[求助]
空白流動相出現(xiàn)倒峰
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| 這兩天做實驗出現(xiàn)倒峰很是頭疼，本人用的流動相是乙腈與磷酸二氫鉀（ph3.2）兩相梯度，在進空白溶劑（磷酸二氫鉀（ph3.2）：乙腈=20:80）時在樣品出峰位置出現(xiàn)倒峰，進乙腈也出現(xiàn)這種情況，但進空針、純水、磷酸二氫鉀（ph3.2）沒有問題，到底是哪里出現(xiàn)的問題，還請各位大蝦們幫幫忙吖……小妹不勝感激 |
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沙伯略
捐助貴賓 (正式寫手)
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【答案】應(yīng)助回帖
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
| 樓主你進的空針、純水、磷酸二氫鉀和空白溶劑結(jié)果不同（倒峰的有無情況不同）可排除流通池污染以及檢測器的極性接反這兩種情況。那么就要從以下兩方面考慮：1.參比波長：樣品在參比波長處有吸收的話，就會出現(xiàn)倒峰。參比波長應(yīng)設(shè)在樣品沒有吸收的地方，且越靠近樣品的檢測波長越好。2.梯度洗脫程序方面：你用的流動相是乙腈與磷酸二氫鉀的梯度洗脫？梯度是什么樣的？如果梯度變化比較劇烈（在短時間內(nèi)變化的比例較大），所對應(yīng)的你所謂的“樣品出峰”時刻流動相比例可能與你的進空白溶劑比例不一致（不是20:80），那么這時就會有吸收，若此時吸收值比溶劑吸收值小，表現(xiàn)給我們的就是倒峰。（你的梯度好好考慮一下），功力尚淺，敬請指教！ |
2樓2013-08-15 00:31:52
3樓2013-08-15 17:20:13
JinyHuang
木蟲 (小有名氣)
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- 專業(yè): 藥物分析
4樓2013-08-19 23:00:12
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