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supermary000金蟲 (小有名氣)
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[求助]
空白流動(dòng)相出現(xiàn)倒峰
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| 這兩天做實(shí)驗(yàn)出現(xiàn)倒峰很是頭疼，本人用的流動(dòng)相是乙腈與磷酸二氫鉀（ph3.2）兩相梯度，在進(jìn)空白溶劑（磷酸二氫鉀（ph3.2）：乙腈=20:80）時(shí)在樣品出峰位置出現(xiàn)倒峰，進(jìn)乙腈也出現(xiàn)這種情況，但進(jìn)空針、純水、磷酸二氫鉀（ph3.2）沒(méi)有問(wèn)題，到底是哪里出現(xiàn)的問(wèn)題，還請(qǐng)各位大蝦們幫幫忙吖……小妹不勝感激 |
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沙伯略
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【答案】應(yīng)助回帖
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
| 樓主你進(jìn)的空針、純水、磷酸二氫鉀和空白溶劑結(jié)果不同（倒峰的有無(wú)情況不同）可排除流通池污染以及檢測(cè)器的極性接反這兩種情況。那么就要從以下兩方面考慮：1.參比波長(zhǎng)：樣品在參比波長(zhǎng)處有吸收的話，就會(huì)出現(xiàn)倒峰。參比波長(zhǎng)應(yīng)設(shè)在樣品沒(méi)有吸收的地方，且越靠近樣品的檢測(cè)波長(zhǎng)越好。2.梯度洗脫程序方面：你用的流動(dòng)相是乙腈與磷酸二氫鉀的梯度洗脫？梯度是什么樣的？如果梯度變化比較劇烈（在短時(shí)間內(nèi)變化的比例較大），所對(duì)應(yīng)的你所謂的“樣品出峰”時(shí)刻流動(dòng)相比例可能與你的進(jìn)空白溶劑比例不一致（不是20:80），那么這時(shí)就會(huì)有吸收，若此時(shí)吸收值比溶劑吸收值小，表現(xiàn)給我們的就是倒峰。（你的梯度好好考慮一下），功力尚淺，敬請(qǐng)指教！ |
2樓2013-08-15 00:31:52
3樓2013-08-15 17:20:13
JinyHuang
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4樓2013-08-19 23:00:12
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