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紫衫月影新蟲 (初入文壇)
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熒光定量PCR標(biāo)準(zhǔn)曲線有問題 亂飛
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今天跑得標(biāo)準(zhǔn)曲線結(jié)果，大蝦們看看是什么原因！ QQ截圖20000825162720.png |
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1、從溶解曲線上看，都在一個(gè)點(diǎn)發(fā)生，排除了引物的問題。 2、不是引物問題就是樓主的加樣方法有問題。 3、標(biāo)準(zhǔn)曲線的做法是以10倍作為稀釋倍數(shù)進(jìn)行，所以再加樣時(shí)提高精確度，通常都是分裝的辦法。如：每個(gè)濃度做三個(gè)管，共做5個(gè)濃度，10倍稀釋。則你要準(zhǔn)備4個(gè)管的量。第一個(gè)最大濃度混合完畢后分裝到體積相同三個(gè)管中，第四個(gè)管進(jìn)行稀釋，然后再分裝。以此類推。 4、不論你怎么加樣，一定要總的開始分的結(jié)束。 |
2樓2013-08-25 18:50:33
cicelyzh
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4樓2013-08-26 14:42:13
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9樓2019-08-16 09:16:20
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