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無(wú)處自怨自艾新蟲 (小有名氣)
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[求助]
熒光定量標(biāo)曲高濃度有非特異性擴(kuò)增，低濃度沒(méi)有
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本人做16SrDNA V3區(qū)域的熒光定量標(biāo)準(zhǔn)曲線，標(biāo)曲6個(gè)點(diǎn)，最高濃度10的8次方，最低10的2次方，標(biāo)曲挺好，但是一看溶解曲線，發(fā)現(xiàn)高濃度到低峰值從87處轉(zhuǎn)移到了85處。把PCR產(chǎn)物做凝膠電泳，發(fā)現(xiàn)高濃度的含有非特異性擴(kuò)增，低濃度的就沒(méi)有。不知道大家有沒(méi)有遇到過(guò)類似的情況，該怎么解決這個(gè)問(wèn)題。拜托了！ |
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