版塊導(dǎo)航: 正在加載中...

登錄注冊

應(yīng)《網(wǎng)絡(luò)安全法》要求，自2017年10月1日起，未進(jìn)行實(shí)名認(rèn)證將不得使用互聯(lián)網(wǎng)跟帖服務(wù)。為保障您的帳號能夠正常使用，請盡快對帳號進(jìn)行手機(jī)號驗(yàn)證，感謝您的理解與支持！

24小時(shí)熱門版塊排行榜

返回列表

lb3522922

銅蟲 (小有名氣)

應(yīng)助: 0 (幼兒園)
金幣: 542.3
帖子: 181
在線: 35小時(shí)
蟲號: 1160474
注冊: 2010-12-02
專業(yè): 環(huán)境微生物學(xué)

[求助] 奇怪的轉(zhuǎn)化子

最近在做一個(gè)大小為2000bp的片段與表達(dá)載體連接，長出的轉(zhuǎn)化子很奇怪。具體做法是這樣的：片段先做TA克隆，與pMD19T載體（2700bp）連接，然后雙酶切，切膠回收得到目的條帶（2000bp），與經(jīng)過相同雙酶切的表達(dá)載體用T4過夜連接，轉(zhuǎn)化大腸桿菌，得到一些轉(zhuǎn)化子，但是測序結(jié)果是含有目的片段的T載體。重復(fù)了兩次，結(jié)果都是這樣。我很困惑，怎么會出現(xiàn)這么奇怪的轉(zhuǎn)化子。請高手們幫忙分析一下。不勝感激。

回復(fù)此樓

» 猜你喜歡

不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)中的趣事：實(shí)驗(yàn)器材的 “烏龍” 已經(jīng)有0人回復(fù)
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)中的趣事：和實(shí)驗(yàn)材料的 “斗智斗勇” 已經(jīng)有0人回復(fù)
化學(xué)工程及工業(yè)化學(xué)論文潤色/翻譯怎么收費(fèi)? 已經(jīng)有272人回復(fù)
蛋白質(zhì)檢測：精準(zhǔn)分析，解鎖生物分子的密碼已經(jīng)有0人回復(fù)
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之小鼠實(shí)驗(yàn)：嚴(yán)謹(jǐn)設(shè)計(jì)，解析生命機(jī)制的重要載體已經(jīng)有0人回復(fù)
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之重金屬檢測：精準(zhǔn)篩查，守護(hù)健康與環(huán)境的防線已經(jīng)有0人回復(fù)
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之“蛙測重金屬我背鍋三千” 已經(jīng)有0人回復(fù)
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之“鼠逃三次我發(fā)三篇SCI” 已經(jīng)有0人回復(fù)
納米粒度分析已經(jīng)有3人回復(fù)
林科院林化所招收材料與化工專業(yè)碩士，坐標(biāo)南京已經(jīng)有0人回復(fù)

» 本主題相關(guān)價(jià)值貼推薦，對您同樣有幫助:

大腸桿菌轉(zhuǎn)化的奇怪問題已經(jīng)有8人回復(fù)
真菌轉(zhuǎn)化子PCR驗(yàn)證問題已經(jīng)有20人回復(fù)
關(guān)于奇怪吸引子維數(shù)的應(yīng)用與意義問題？大蝦請指教已經(jīng)有9人回復(fù)
正態(tài)分布的數(shù)據(jù)經(jīng)過對數(shù)轉(zhuǎn)換后居然成非正態(tài)分布了,奇怪。已經(jīng)有5人回復(fù)
畢赤酵母表達(dá)一直不表達(dá) 已經(jīng)有13人回復(fù)
最奇怪的 Tricine SDS PAGE 怎么會成這樣子？樣品完全看不出 marker還行已經(jīng)有8人回復(fù)
構(gòu)建克隆載體時(shí)出現(xiàn)的問題已經(jīng)有11人回復(fù)
PCR產(chǎn)生非特異性帶已經(jīng)有11人回復(fù)
奇怪的PCR產(chǎn)物已經(jīng)有9人回復(fù)
red基因敲除轉(zhuǎn)化子已經(jīng)有3人回復(fù)
畢赤酵母表達(dá)出蛋白但沒有活性已經(jīng)有18人回復(fù)
畢赤酵母表達(dá)的蛋白無活性已經(jīng)有8人回復(fù)
轉(zhuǎn)化連接遇到的奇怪的事！已經(jīng)有3人回復(fù)
9k表達(dá)質(zhì)粒電轉(zhuǎn)化km71 已經(jīng)有8人回復(fù)
單酶切，酶連之后驗(yàn)證問題已經(jīng)有6人回復(fù)
載體連接已經(jīng)有7人回復(fù)
真菌轉(zhuǎn)座子突變相關(guān)問題已經(jīng)有3人回復(fù)
【求助/交流】表達(dá)載體轉(zhuǎn)化后,提取的質(zhì)粒和原來不一樣了啊已經(jīng)有5人回復(fù)
【求助/交流】質(zhì)粒的轉(zhuǎn)化體積為什么不能超過感受態(tài)的十分之一已經(jīng)有16人回復(fù)
【求助/交流】在線等：E.coli BL21 轉(zhuǎn)化子在kan平板上要長多久已經(jīng)有8人回復(fù)
【求助/交流】釀酒酵母利用半乳糖的問題已經(jīng)有13人回復(fù)
【求助/交流】關(guān)于平末端連接已經(jīng)有25人回復(fù)
【求助/交流】關(guān)于基因敲除已經(jīng)有21人回復(fù)
【求助/交流】長片段的連接轉(zhuǎn)化已經(jīng)有9人回復(fù)
word轉(zhuǎn)pdf遇到的奇怪問題已經(jīng)有13人回復(fù)

1樓 2013-09-04 10:09:15

已閱回復(fù)此樓關(guān)注TA 給TA發(fā)消息送TA紅花 TA的回帖

xiaopeiliang

金蟲 (小有名氣)

應(yīng)助: 21 (小學(xué)生)
金幣: 349.1
散金: 75
紅花: 6
帖子: 151
在線: 70.4小時(shí)
蟲號: 1044898
注冊: 2010-06-21
性別: GG
專業(yè): 食品科學(xué)基礎(chǔ)

【答案】應(yīng)助回帖

★
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
gyesang: 金幣+1, 鼓勵(lì)回帖應(yīng)助！ 2013-09-04 21:02:50

轉(zhuǎn)化子質(zhì)粒提出來之后電泳檢測過嗎，大小對不對啊

贊一下

回復(fù)此樓

2樓2013-09-04 17:18:50

已閱回復(fù)此樓關(guān)注TA 給TA發(fā)消息送TA紅花 TA的回帖

相關(guān)版塊跳轉(zhuǎn) 我要訂閱樓主 lb3522922 的主題更新