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lb3522922銅蟲 (小有名氣)
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[求助]
奇怪的轉(zhuǎn)化子
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| 最近在做一個大小為2000bp的片段與表達載體連接,長出的轉(zhuǎn)化子很奇怪。具體做法是這樣的:片段先做TA克隆,與pMD19T載體(2700bp)連接,然后雙酶切,切膠回收得到目的條帶(2000bp),與經(jīng)過相同雙酶切的表達載體用T4過夜連接,轉(zhuǎn)化大腸桿菌,得到一些轉(zhuǎn)化子,但是測序結果是含有目的片段的T載體。重復了兩次,結果都是這樣。我很困惑,怎么會出現(xiàn)這么奇怪的轉(zhuǎn)化子。請高手們幫忙分析一下。不勝感激。 |
金蟲 (小有名氣)
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