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熒光PCR探針特異性不足如何優(yōu)化?
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陰性陽性DNA模板的上游下游引物都是一樣的,但是探針中間有兩個連續(xù)的堿基不同 理論上,探針有一個不同就沒有信號了 但是,實際結(jié)果是:陽性模板CT值為23,陰性模板CT值28(二步法,60度退火延伸) 然后我又把退火溫度提高到61度和62度,結(jié)果陽性CT值不變,陰性模板CT值29,30 請問一下,有什么優(yōu)化方法可以提高特異性,讓陰性模板沒有擴增曲線? |

木蟲 (正式寫手)

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