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[求助]
熒光PCR探針特異性不足如何優(yōu)化？
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陰性陽(yáng)性DNA模板的上游下游引物都是一樣的，但是探針中間有兩個(gè)連續(xù)的堿基不同 理論上，探針有一個(gè)不同就沒(méi)有信號(hào)了 但是，實(shí)際結(jié)果是：陽(yáng)性模板CT值為23，陰性模板CT值28（二步法，60度退火延伸） 然后我又把退火溫度提高到61度和62度，結(jié)果陽(yáng)性CT值不變，陰性模板CT值29,30 請(qǐng)問(wèn)一下，有什么優(yōu)化方法可以提高特異性，讓陰性模板沒(méi)有擴(kuò)增曲線？ |
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hl16010921
木蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)
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3樓2013-09-28 16:19:10
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