 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 5 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 2594 | 回復(fù): 14 | |||
| 當(dāng)前只顯示滿足指定條件的回帖，點(diǎn)擊這里查看本話題的所有回帖 | |||
514278815木蟲 (小有名氣)
|
[求助]
原核表達(dá)蛋白復(fù)性的具體方案
|
||
|
原核表達(dá)復(fù)性做了一個(gè)月了，純出來的量很少，希望蟲友們給點(diǎn)建議吧，最好有詳細(xì)的步驟； 由于需要的蛋白量較大，我才用的是柱復(fù)性；包涵體超聲破碎后，用洗滌液洗好后重溶到含8M尿素的緩沖液中；復(fù)性采用梯度復(fù)性8M-2M的梯度在superdex-75上復(fù)性；復(fù)性后進(jìn)行透析，透析時(shí)出現(xiàn)沉淀，開始懷疑透析梯度大過快了，就采用柱上緩慢換液，發(fā)現(xiàn)換液效果不好，真正到達(dá)目的緩沖液的蛋白很少；懷疑蛋白在柱子上析出來了。希望蟲友給些建議吧，目前懷疑蛋白復(fù)性效果不佳，希望能給一個(gè)合理的柱上復(fù)性方案 |
回復(fù)此樓» 收錄本帖的淘帖專輯推薦
 蛋白質(zhì)生物學(xué)實(shí)驗(yàn)經(jīng)驗(yàn) |
» 猜你喜歡
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)中的趣事：實(shí)驗(yàn)器材的 “烏龍”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)中的趣事：和實(shí)驗(yàn)材料的 “斗智斗勇”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
化學(xué)工程及工業(yè)化學(xué)論文潤色/翻譯怎么收費(fèi)?
已經(jīng)有145人回復(fù)
-
蛋白質(zhì)檢測：精準(zhǔn)分析，解鎖生物分子的密碼
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之小鼠實(shí)驗(yàn)：嚴(yán)謹(jǐn)設(shè)計(jì)，解析生命機(jī)制的重要載體
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之重金屬檢測：精準(zhǔn)篩查，守護(hù)健康與環(huán)境的防線
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之“蛙測重金屬我背鍋三千”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之“鼠逃三次我發(fā)三篇SCI”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
納米粒度分析
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
林科院林化所招收材料與化工專業(yè)碩士，坐標(biāo)南京
已經(jīng)有0人回復(fù)
» 本主題相關(guān)價(jià)值貼推薦，對您同樣有幫助:
- 原核上清表達(dá)條件
已經(jīng)有6人回復(fù)
- 原核表達(dá)只能在沉淀中檢測出目標(biāo)蛋白怎么辦
已經(jīng)有9人回復(fù)
- 原核表達(dá)蛋白時(shí)標(biāo)簽無論在N端還是C端蛋白折疊時(shí)都被折進(jìn)去了，怎么辦
已經(jīng)有18人回復(fù)
- 原核表達(dá) 蛋白質(zhì)全在沉淀里，這是怎么回事啊
已經(jīng)有12人回復(fù)
- 蛋白表達(dá)不出來，是什么原因造成的
已經(jīng)有7人回復(fù)
- 原核表達(dá)載體蛋白誘導(dǎo)
已經(jīng)有18人回復(fù)
- 原核表達(dá)蛋白變小
已經(jīng)有4人回復(fù)
- 原核表達(dá)，蛋白活性問題
已經(jīng)有12人回復(fù)
- 透析 蛋白沉淀 復(fù)性
已經(jīng)有22人回復(fù)
- 做過跨膜蛋白原核表達(dá)的戰(zhàn)友過來看看哦
已經(jīng)有18人回復(fù)
- 原核表達(dá)形成了包涵體怎么辦�。�
已經(jīng)有22人回復(fù)
- pET-28a原核不能表達(dá)目的蛋白
已經(jīng)有17人回復(fù)
- pet30a原核表達(dá)蛋白大小問題
已經(jīng)有4人回復(fù)
- 關(guān)于用Ni-NTA His.bind樹脂純化原核表達(dá)蛋白
已經(jīng)有16人回復(fù)
- 原核表達(dá)蛋白誘導(dǎo)不出來
已經(jīng)有16人回復(fù)
- 原核表達(dá)系統(tǒng)不表達(dá)目的蛋白
已經(jīng)有8人回復(fù)
- 【求助/交流】如何讓一個(gè)蛋白在原核細(xì)胞中表達(dá)
已經(jīng)有3人回復(fù)
- 【求助/交流】離子交換純化原核表達(dá)蛋白
已經(jīng)有15人回復(fù)
- 【求助/交流】原核表達(dá)蛋白純化
已經(jīng)有29人回復(fù)
4樓2013-11-02 16:40:32
shenlin0514
木蟲 (正式寫手)
無名小蟲
- 應(yīng)助: 4 (幼兒園)
- 金幣: 3197.3
- 散金: 897
- 紅花: 3
- 帖子: 810
- 在線: 100.3小時(shí)
- 蟲號: 299250
- 注冊: 2006-11-25
- 性別: GG
- 專業(yè): 免疫學(xué)研究新技術(shù)與新方法
【答案】應(yīng)助回帖
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ...
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
kx444555: 金幣+1, 鼓勵(lì)交流 2013-11-01 11:35:41
514278815: 金幣+55 2013-11-01 19:52:18
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
kx444555: 金幣+1, 鼓勵(lì)交流 2013-11-01 11:35:41
514278815: 金幣+55 2013-11-01 19:52:18
| 建議你再分析一下該蛋白的二級結(jié)構(gòu)，是否存在大量的疏水區(qū)域，有時(shí)添加Tag可以幫助其復(fù)性。另外，可以考慮表面活性劑的使用。 |
2樓2013-11-01 10:33:59
514278815
木蟲 (小有名氣)
- 應(yīng)助: 7 (幼兒園)
- 金幣: 2857.6
- 散金: 200
- 紅花: 3
- 帖子: 137
- 在線: 107.2小時(shí)
- 蟲號: 2458441
- 注冊: 2013-05-10
- 性別: GG
- 專業(yè): 抗體工程學(xué)
3樓2013-11-01 19:55:16
514278815
木蟲 (小有名氣)
- 應(yīng)助: 7 (幼兒園)
- 金幣: 2857.6
- 散金: 200
- 紅花: 3
- 帖子: 137
- 在線: 107.2小時(shí)
- 蟲號: 2458441
- 注冊: 2013-05-10
- 性別: GG
- 專業(yè): 抗體工程學(xué)
5樓2013-11-02 17:36:58
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 285求調(diào)劑 +5 | ytter 2026-03-22 | 5/250 |
|
|---|---|---|---|---|
|
|
[考研] 303求調(diào)劑 +4 | 安憶靈 2026-03-22 | 5/250 |
|
|
[考研] 一志愿南大，0703化學(xué)，分?jǐn)?shù)336，求調(diào)劑 +3 | 收到VS 2026-03-21 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 【考研調(diào)劑】化學(xué)專業(yè) 281分，一志愿四川大學(xué)，誠心求調(diào)劑 +11 | 吃吃吃才有意義 2026-03-19 | 11/550 |
|
|
|
[考研] 307求調(diào)劑 +3 | wyyyqx 2026-03-17 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 299求調(diào)劑 +6 | △小透明* 2026-03-17 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 二本跨考鄭大材料306英一數(shù)二 +3 | z1z2z3879 2026-03-17 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 265求調(diào)劑 +9 | 梁梁校校 2026-03-17 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 一志愿重慶大學(xué)085700資源與環(huán)境專碩，總分308求調(diào)劑 +3 | 墨墨漠 2026-03-18 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 一志愿西南交大，求調(diào)劑 +5 | 材化逐夢人 2026-03-18 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 304求調(diào)劑 +7 | 司空. 2026-03-18 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 323求調(diào)劑 +3 | 洼小桶 2026-03-18 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 一志愿中南化學(xué)（0703）總分337求調(diào)劑 +8 | niko- 2026-03-19 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 材料學(xué)求調(diào)劑 +4 | Stella_Yao 2026-03-20 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 工科材料085601 279求調(diào)劑 +7 | 困于星晨 2026-03-17 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 材料學(xué)碩318求調(diào)劑 +5 | February_Feb 2026-03-19 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 0854可跨調(diào)劑，一作一項(xiàng)核心論文五項(xiàng)專利，省、國級證書40+數(shù)一英一287 +8 | 小李0854 2026-03-16 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 考研求調(diào)劑 +3 | 橘頌. 2026-03-17 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 有沒有道鐵/土木的想調(diào)劑南林，給自己招師弟中～ +3 | TqlXswl 2026-03-16 | 7/350 |
|
|
|
[考博] 26申博 +4 | 八6八68 2026-03-16 | 4/200 |
|