 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 5 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 2615 | 回復(fù): 14 | |||
| 當(dāng)前只顯示滿(mǎn)足指定條件的回帖，點(diǎn)擊這里查看本話(huà)題的所有回帖 | |||
514278815木蟲(chóng) (小有名氣)
|
[求助]
原核表達(dá)蛋白復(fù)性的具體方案
|
||
|
原核表達(dá)復(fù)性做了一個(gè)月了，純出來(lái)的量很少，希望蟲(chóng)友們給點(diǎn)建議吧，最好有詳細(xì)的步驟； 由于需要的蛋白量較大，我才用的是柱復(fù)性；包涵體超聲破碎后，用洗滌液洗好后重溶到含8M尿素的緩沖液中；復(fù)性采用梯度復(fù)性8M-2M的梯度在superdex-75上復(fù)性；復(fù)性后進(jìn)行透析，透析時(shí)出現(xiàn)沉淀，開(kāi)始懷疑透析梯度大過(guò)快了，就采用柱上緩慢換液，發(fā)現(xiàn)換液效果不好，真正到達(dá)目的緩沖液的蛋白很少；懷疑蛋白在柱子上析出來(lái)了。希望蟲(chóng)友給些建議吧，目前懷疑蛋白復(fù)性效果不佳，希望能給一個(gè)合理的柱上復(fù)性方案 |
回復(fù)此樓» 收錄本帖的淘帖專(zhuān)輯推薦
 蛋白質(zhì)生物學(xué)實(shí)驗(yàn)經(jīng)驗(yàn) |
» 猜你喜歡
蛋白質(zhì)檢測(cè)：精準(zhǔn)分析，解鎖生物分子的密碼
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之小鼠實(shí)驗(yàn)：嚴(yán)謹(jǐn)設(shè)計(jì)，解析生命機(jī)制的重要載體
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
化學(xué)工程及工業(yè)化學(xué)論文潤(rùn)色/翻譯怎么收費(fèi)?
已經(jīng)有224人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之重金屬檢測(cè)：精準(zhǔn)篩查，守護(hù)健康與環(huán)境的防線(xiàn)
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之“蛙測(cè)重金屬我背鍋三千”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之“鼠逃三次我發(fā)三篇SCI”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
納米粒度分析
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
林科院林化所招收材料與化工專(zhuān)業(yè)碩士，坐標(biāo)南京
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
留學(xué)--博士招生
已經(jīng)有15人回復(fù)
-
化學(xué)工程，本211，求調(diào)劑，ab區(qū)不限
已經(jīng)有4人回復(fù)
» 本主題相關(guān)價(jià)值貼推薦，對(duì)您同樣有幫助:
- 原核上清表達(dá)條件
已經(jīng)有6人回復(fù)
- 原核表達(dá)只能在沉淀中檢測(cè)出目標(biāo)蛋白怎么辦
已經(jīng)有9人回復(fù)
- 原核表達(dá)蛋白時(shí)標(biāo)簽無(wú)論在N端還是C端蛋白折疊時(shí)都被折進(jìn)去了，怎么辦
已經(jīng)有18人回復(fù)
- 原核表達(dá) 蛋白質(zhì)全在沉淀里，這是怎么回事啊
已經(jīng)有12人回復(fù)
- 蛋白表達(dá)不出來(lái)，是什么原因造成的
已經(jīng)有7人回復(fù)
- 原核表達(dá)載體蛋白誘導(dǎo)
已經(jīng)有18人回復(fù)
- 原核表達(dá)蛋白變小
已經(jīng)有4人回復(fù)
- 原核表達(dá)，蛋白活性問(wèn)題
已經(jīng)有12人回復(fù)
- 透析 蛋白沉淀 復(fù)性
已經(jīng)有22人回復(fù)
- 做過(guò)跨膜蛋白原核表達(dá)的戰(zhàn)友過(guò)來(lái)看看哦
已經(jīng)有18人回復(fù)
- 原核表達(dá)形成了包涵體怎么辦��？
已經(jīng)有22人回復(fù)
- pET-28a原核不能表達(dá)目的蛋白
已經(jīng)有17人回復(fù)
- pet30a原核表達(dá)蛋白大小問(wèn)題
已經(jīng)有4人回復(fù)
- 關(guān)于用Ni-NTA His.bind樹(shù)脂純化原核表達(dá)蛋白
已經(jīng)有16人回復(fù)
- 原核表達(dá)蛋白誘導(dǎo)不出來(lái)
已經(jīng)有16人回復(fù)
- 原核表達(dá)系統(tǒng)不表達(dá)目的蛋白
已經(jīng)有8人回復(fù)
- 【求助/交流】如何讓一個(gè)蛋白在原核細(xì)胞中表達(dá)
已經(jīng)有3人回復(fù)
- 【求助/交流】離子交換純化原核表達(dá)蛋白
已經(jīng)有15人回復(fù)
- 【求助/交流】原核表達(dá)蛋白純化
已經(jīng)有29人回復(fù)
514278815
木蟲(chóng) (小有名氣)
- 應(yīng)助: 7 (幼兒園)
- 金幣: 2857.6
- 散金: 200
- 紅花: 3
- 帖子: 137
- 在線(xiàn): 107.2小時(shí)
- 蟲(chóng)號(hào): 2458441
- 注冊(cè): 2013-05-10
- 性別: GG
- 專(zhuān)業(yè): 抗體工程學(xué)
5樓2013-11-02 17:36:58
shenlin0514
木蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)
無(wú)名小蟲(chóng)
- 應(yīng)助: 4 (幼兒園)
- 金幣: 3197.3
- 散金: 897
- 紅花: 3
- 帖子: 810
- 在線(xiàn): 100.3小時(shí)
- 蟲(chóng)號(hào): 299250
- 注冊(cè): 2006-11-25
- 性別: GG
- 專(zhuān)業(yè): 免疫學(xué)研究新技術(shù)與新方法
【答案】應(yīng)助回帖
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ...
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
kx444555: 金幣+1, 鼓勵(lì)交流 2013-11-01 11:35:41
514278815: 金幣+55 2013-11-01 19:52:18
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
kx444555: 金幣+1, 鼓勵(lì)交流 2013-11-01 11:35:41
514278815: 金幣+55 2013-11-01 19:52:18
| 建議你再分析一下該蛋白的二級(jí)結(jié)構(gòu)，是否存在大量的疏水區(qū)域，有時(shí)添加Tag可以幫助其復(fù)性。另外，可以考慮表面活性劑的使用。 |
2樓2013-11-01 10:33:59
514278815
木蟲(chóng) (小有名氣)
- 應(yīng)助: 7 (幼兒園)
- 金幣: 2857.6
- 散金: 200
- 紅花: 3
- 帖子: 137
- 在線(xiàn): 107.2小時(shí)
- 蟲(chóng)號(hào): 2458441
- 注冊(cè): 2013-05-10
- 性別: GG
- 專(zhuān)業(yè): 抗體工程學(xué)
3樓2013-11-01 19:55:16
歐陽(yáng)-90
銀蟲(chóng) (小有名氣)
- 應(yīng)助: 11 (小學(xué)生)
- 金幣: 241.6
- 散金: 200
- 紅花: 1
- 帖子: 179
- 在線(xiàn): 70.9小時(shí)
- 蟲(chóng)號(hào): 2290657
- 注冊(cè): 2013-02-20
- 專(zhuān)業(yè): 基因組學(xué)
4樓2013-11-02 16:40:32
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 083000學(xué)碩274求調(diào)劑 +6 | Li李魚(yú) 2026-03-26 | 6/300 |
|
|---|---|---|---|---|
|
|
[考研] 化學(xué)調(diào)劑 +4 | 愛(ài)吃番茄的旭 2026-03-24 | 5/250 |
|
|
[考研] 安徽大學(xué)專(zhuān)碩生物與醫(yī)藥專(zhuān)業(yè)(086000)324分，英語(yǔ)已過(guò)四六級(jí)，六級(jí)521，求調(diào)劑 +4 | 美味可樂(lè)雞翅 2026-03-26 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 348求調(diào)劑 +4 | 小懶蟲(chóng)不懶了 2026-03-27 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 材料求調(diào)劑 +8 | @taotao 2026-03-21 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 調(diào)劑求收留 +7 | 果然有我 2026-03-26 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 341求調(diào)劑 +7 | 青檸檬1 2026-03-26 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 071000生物學(xué)求調(diào)劑，初試成績(jī)343 +6 | 小小甜面團(tuán) 2026-03-25 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 一志愿河工大 081700 276求調(diào)劑 +4 | 地球繞著太陽(yáng)轉(zhuǎn) 2026-03-23 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 環(huán)境專(zhuān)碩324分求調(diào)劑推薦 +5 | 軒小寧—— 2026-03-26 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 一志愿哈工大，085400，320，求調(diào)劑 +4 | gdlf9999 2026-03-24 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 材料與化工328分調(diào)劑 +6 | 。，。，。，。i 2026-03-23 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 0854電子信息求調(diào)劑 +7 | α____ 2026-03-22 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 347求調(diào)劑 +4 | L when 2026-03-25 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 086003食品工程求調(diào)劑 +6 | 淼淼111 2026-03-24 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 318求調(diào)劑 +5 | plum李子 2026-03-21 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 277分求調(diào)劑，跨調(diào)材料 +3 | 考研調(diào)劑lxh 2026-03-24 | 3/150 |
|
|
|
[基金申請(qǐng)] 請(qǐng)教下大家 2026年國(guó)家基金申請(qǐng)是雙盲審嗎？ +3 | lishucheng1 2026-03-22 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 333求調(diào)劑 +3 | ALULU4408 2026-03-23 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 275求調(diào)劑 +6 | shansx 2026-03-22 | 8/400 |
|