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xujingyuanxu銅蟲 (正式寫手)
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[求助]
求助：ISSR擴(kuò)增條帶問題解決 已有1人參與
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各位大神好，本人最近在做ISSR的分子標(biāo)記，有幾個(gè)問題想求助：1、擴(kuò)增不同地區(qū)的植物樣本如圖，擴(kuò)增產(chǎn)物跑膠后，總是看著有白色的拖尾，且條帶之間不如文章上附圖那么清晰可辨，不知道是什么原因；2、跑出來的條帶會(huì)呈現(xiàn)成啞鈴型，有時(shí)候一排膠跑的還呈現(xiàn)波浪狀狀，不明白什么原因，請(qǐng)大神指點(diǎn)！ hp 2014-01-14.jpg hp 2014-01-16 xjy-pcr-4.jpg |
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2樓2014-02-27 23:08:06
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3樓2014-02-28 21:50:14
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您PCR中加入的DNA模版量已經(jīng)很低了，再加上反應(yīng)體系進(jìn)一步稀釋。有雜質(zhì)什么的也都被稀釋了吧。。。。 沒有用RNA酶處理沒關(guān)系，不影響ISSR實(shí)驗(yàn)結(jié)果。另外您說的RNA降解一般都這么說，應(yīng)該會(huì)被降解了吧，不過不好說 跑DNA時(shí)梳孔處的亮點(diǎn)可能蛋白多糖多酚什么的都有可能，如果不影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果，就不用糾結(jié)。 我覺得您的關(guān)鍵點(diǎn)是在PCR上，做ISSR時(shí)就是DNA提的再爛都能做出來的，別糾結(jié)提DNA的方法了。好好看看PCR反應(yīng)有沒有可能引入什么污染。尤其是水！ |
4樓2014-03-01 06:28:30
xujingyuanxu
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8樓2014-12-04 12:56:40
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9樓2014-12-18 14:39:24
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