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xujingyuanxu銅蟲 (正式寫手)
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[求助]
求助：ISSR擴增條帶問題解決 已有1人參與
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各位大神好，本人最近在做ISSR的分子標(biāo)記，有幾個問題想求助：1、擴增不同地區(qū)的植物樣本如圖，擴增產(chǎn)物跑膠后，總是看著有白色的拖尾，且條帶之間不如文章上附圖那么清晰可辨，不知道是什么原因；2、跑出來的條帶會呈現(xiàn)成啞鈴型，有時候一排膠跑的還呈現(xiàn)波浪狀狀，不明白什么原因，請大神指點！ hp 2014-01-14.jpg hp 2014-01-16 xjy-pcr-4.jpg |
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9樓2014-12-18 14:39:24
新人小玥
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2樓2014-02-27 23:08:06
xujingyuanxu
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3樓2014-02-28 21:50:14
新人小玥
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您PCR中加入的DNA模版量已經(jīng)很低了，再加上反應(yīng)體系進(jìn)一步稀釋。有雜質(zhì)什么的也都被稀釋了吧。。。。 沒有用RNA酶處理沒關(guān)系，不影響ISSR實驗結(jié)果。另外您說的RNA降解一般都這么說，應(yīng)該會被降解了吧，不過不好說 跑DNA時梳孔處的亮點可能蛋白多糖多酚什么的都有可能，如果不影響實驗結(jié)果，就不用糾結(jié)。 我覺得您的關(guān)鍵點是在PCR上，做ISSR時就是DNA提的再爛都能做出來的，別糾結(jié)提DNA的方法了。好好看看PCR反應(yīng)有沒有可能引入什么污染。尤其是水！ |
4樓2014-03-01 06:28:30
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