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[求助]
融合PCR詳細步驟 已有3人參與
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| 請問怎么做融合PCR(重疊延伸PCR),請列出詳細步驟,萬分感謝 |
新蟲 (著名寫手)
金蟲 (正式寫手)
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好,來相助一把。 在重疊的一段設計一對完全互補的引物(P1-Reverse和P2-Forward)。 1. 使用引物P1-Forward,P1-Reverse擴增片段Segment1;使用引物P2-Forward,P2-Reverse擴增片段Segment2. 2. 取一些第一輪PCR產物(5ul/25ul即可),重新加入Taq酶和dNTPs,buffer等,延伸一輪,15min左右。 3. 加入P1-Forward和P2-Reverse,進行第二輪PCR。 4.產物回收。 應該可以,具體細節(jié)根據你的引物和片段來定。 |
鐵桿木蟲 (正式寫手)

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