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[求助]
有關(guān)重疊PCR的問題求指導(dǎo),謝謝。。 已有2人參與
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我想將一段400bp DNA片段與一段3500bp DNA連接,請問重疊pcr適合嗎?有什么要注意的?文獻(xiàn)上說做重疊pcr的兩條片段需大小接近,我這種情況是不是不適合使用重疊pcr? 還望蟲友指導(dǎo)下,謝謝啦。! |
銀蟲 (小有名氣)
| 可以的,我曾經(jīng)做過4K與200bp的overlap,設(shè)計引物的時候注意點,在設(shè)置overlap引物的時候,假設(shè)A與B overlap,將A的反向引物設(shè)置到60bp,30bp是A上面的,30bp是B上的,B的正向引物是A的反向引物的反向互補序列,也就是最終的overlap區(qū)能達(dá)到60bp,不知道這樣描述你懂了沒? |
木蟲 (著名寫手)
木蟲 (著名寫手)
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