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檸檬可樂星新蟲 (小有名氣)
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[求助]
PCR產(chǎn)物測序結(jié)果差 求分析 已有6人參與
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各位大神：我之前做了個PCR，電泳結(jié)果如下圖（條帶從左到右依次是1、2、3、4），1、2是18S，約1kb，3、4是28S，約700bp，其中1、3是同一個DNA模板，2、4是同一個的。我看主帶清晰也挺亮的，就直接送華大測序了，結(jié)果出來沒有一個成功的，華大反饋的原因是：1：測序失敗，峰圖質(zhì)量差，可信序列僅100bp；2：雜合，多位點規(guī)則套峰；3：重復(fù)序列，重復(fù)序列后峰圖變亂；4：重復(fù)序列，重復(fù)序列后峰圖變亂。 我想請問：1、PCR結(jié)果像我這樣的，測序結(jié)果卻全部失敗，正常嗎？會是什么原因？測序公司的問題還是我做的物種的基因問題？ 2、搞不清楚他所謂的“重復(fù)序列”是什么情況，有知道的大蝦幫忙分析一下吧。 3、像我這個情況做克隆后再測序管用嗎？特別是“重復(fù)序列”的做克隆可以嗎？ 跪求高手指點，感激不盡��！ 圖片1.png |
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2樓2014-04-10 16:11:03
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