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活性污泥中DNA模板的提取成功，但PCR擴(kuò)增不出條帶。 已有3人參與
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使用FastDNA® SPIN kit for Soil分別提取 “土壤” 和 “活性污泥” 中的細(xì)菌DNA模板，總DNA模板直接電泳檢測，條帶都非常亮。但是PCR擴(kuò)增16S rRNA基因，只有土壤的模板正常出帶  ，活性污泥的樣品不出帶 ，或者條帶非常非常弱和彌散 。我看文章中，大家都使用這個試劑盒提取活性污泥中的DNA模板的，為什么我用就不行了呢？ 不換了多個活性污泥樣品，結(jié)果一樣的。 PCR擴(kuò)增其他的基因，也是上面一樣的結(jié)果。 非常著急，困擾我的實驗很久了，一直解決不了啊  。大家遇到過類似的情況嗎 ？ 請幫我分析分析吧 |
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【答案】應(yīng)助回帖
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nlhnq55: 金幣+5, ★★★很有幫助 2014-06-28 21:41:57
nlhnq55: 金幣+5, ★★★很有幫助 2014-06-28 21:41:57
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發(fā)酵殘余物和活性污泥的DNA提取好像和土壤不太一樣，我自己也快要提了，不過還沒試過。降低腐植酸好像是一點【秸稈沼氣干發(fā)酵基質(zhì)中微生物dna 提取方法篩選】，然后就是提取效率，就是能提出來的DNA占總量的多少（一般偏低）【Evaluation of several DNA extraction methods for obtaining total community DNA from anaerobic digestion sludge】。 文獻(xiàn)沒找到多少，我也還再研究 |
3樓2014-06-27 23:17:36
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2樓2014-06-20 23:35:37
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5樓2014-08-22 22:55:18
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