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思凡木蟲 (正式寫手)
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發(fā)酵產(chǎn)物測(cè)定問題 已有3人參與
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本人最近在用5L發(fā)酵罐做實(shí)驗(yàn)，根據(jù)一些參數(shù)變化，我可以確定在長(zhǎng)產(chǎn)物，但我每隔六小時(shí)取次樣，測(cè)出來(lái)有時(shí)長(zhǎng)很多，有時(shí)數(shù)值反而變小了，我的菌代謝太旺盛了，一直要加很多消泡劑，不然就跑液，其中消泡劑和水的比例是1：10，會(huì)不會(huì)打個(gè)比方，本來(lái)3L里有33克，這樣測(cè)出來(lái)11g/L，它長(zhǎng)到了40克，我也加了很多消泡劑，比如1L，反而測(cè)出來(lái)沒有11g/L了，這樣我怎么知道我那個(gè)罐里具體實(shí)際產(chǎn)了多少產(chǎn)物呢？望大家?guī)兔ο胂朕k法，謝謝啦 [ 發(fā)自手機(jī)版 http://www.gaoyang168.com/3g ] |
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4樓2014-08-03 09:30:25
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5樓2014-08-03 10:18:42
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6樓2014-08-03 20:36:39
【答案】應(yīng)助回帖
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根據(jù)菌體類型、代謝產(chǎn)物選擇消泡劑，比如，我們用的是氨基酸專用消泡劑！ 美國(guó)陶氏103也不錯(cuò)！ 消泡劑不稀釋也可以用，到時(shí)候蠕動(dòng)泵點(diǎn)一滴就ok了。 6個(gè)小時(shí)取一次樣，時(shí)間太長(zhǎng)了，估計(jì)中間控制也不精細(xì)，所以產(chǎn)量才不穩(wěn)！ 此外，滅菌也很重要，原位滅菌的話，建議關(guān)小排氣，以最小的排氣量消罐，這樣泡沫能控制的非常小。 前期，盡量提轉(zhuǎn)速，轉(zhuǎn)速提的差不多了，適量提風(fēng)，再提罐壓。 |
7樓2014-08-04 11:32:49
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這個(gè)問題應(yīng)該分三方面去考慮： 1、消泡劑對(duì)產(chǎn)物有損害，換消泡劑或提高罐壓試試。 2、菌種或者工藝有問題。前期菌種長(zhǎng)得比較好，你認(rèn)為他的產(chǎn)率比較高，到一定周期就長(zhǎng)得很慢了，或者基本可以判定是發(fā)酵終點(diǎn)了。這需要你涂片看看細(xì)胞形態(tài)，如果有尾氣分析就更好了，算下OUR，看看變化趨勢(shì)。我們之前做的新產(chǎn)品研發(fā)時(shí)，菌株有問題或工藝有問題，效價(jià)就是時(shí)間不長(zhǎng)就下來(lái)了。 3、如果產(chǎn)物濃度有時(shí)漲得多，有時(shí)不漲或者減少，懷疑你測(cè)樣誤差所致，檢測(cè)你的檢測(cè)試劑、儀器、測(cè)樣人。 |
8樓2014-08-04 11:46:17
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非常感謝您的回答，我解釋一下，以前四小時(shí)取一次，被幾個(gè)老師都說沒必要，太頻繁了，所以改成六小時(shí)的，我看做我們這個(gè)的，大多數(shù)SCI論文都是八小時(shí)甚至12小時(shí)測(cè)定一下，控制的話我們是24小時(shí)有人看著進(jìn)行控制的，嚴(yán)格控制我們需要的pH和溶氧的，我們的設(shè)備只能離線滅菌，最后一條的話，我們現(xiàn)在只能盡量這么做，我們把一些需要的單因素全做了，包括轉(zhuǎn)速，通氣，罐壓，現(xiàn)在綜合起來(lái)操作了，有時(shí)候有點(diǎn)難處理，我是我們這邊第一個(gè)做這個(gè)的，沒什么經(jīng)驗(yàn)，只能慢慢摸索了 |
9樓2014-08-04 22:06:55
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10樓2014-08-04 22:19:16
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