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[交流] 不同公司的雙酶切內(nèi)切酶buff不一樣嗎已有5人參與

兩個(gè)酶分別是hind3和BamH1，以前用的takara的（http://wenku.baidu.com/view/33499b27192e45361066f571.html），現(xiàn)在實(shí)驗(yàn)室換成Thermo（http://www.loybio.com/molecular-biology/t2604/），我上網(wǎng)搜這兩個(gè)公司的buff不一樣啊
還有那個(gè)10乘K buff難道就是1乘K buff的濃度十倍嗎，怎么katara里面的感覺(jué)不是這個(gè)意思？新手不懂

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1樓 2014-11-24 12:13:33

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cckk_2000

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西門(mén)吹雪170: 金幣+2, 鼓勵(lì)回帖交流 2014-11-24 19:05:01

不同公司的酶的buffer是會(huì)有區(qū)別，但是一般不至于影響酶的活性，但是建議最好選擇同一家公司的酶，而且你的酶是快酶還是慢酶，必須看說(shuō)明書(shū)。10x的buffer意思是取1微升這個(gè)buffer加9微升其他體系，正好緩沖液的pH是酶的最適pH。

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科研炮灰

2樓2014-11-24 14:48:40

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cuizk3

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buffer是不一樣的，另外最好選用同一個(gè)buffer

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超越自我

3樓2014-11-25 15:48:29

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臨時(shí)急用的話(huà)，還是可以對(duì)付的
有些活性稍微弱些，有些基本無(wú)差別

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4樓2014-11-25 17:11:22

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2樓: Originally posted by cckk_2000 at 2014-11-24 14:48:40
不同公司的酶的buffer是會(huì)有區(qū)別，但是一般不至于影響酶的活性，但是建議最好選擇同一家公司的酶，而且你的酶是快酶還是慢酶，必須看說(shuō)明書(shū)。10x的buffer意思是取1微升這個(gè)buffer加9微升其他體系，正好緩沖液的pH是 ...

原來(lái)還是有區(qū)別的，像我們用takara的時(shí)候這兩種酶用的就是10乘K buff，thermo的酶是兩個(gè)單獨(dú)的說(shuō)明書(shū)，各陪自己的buff，我上網(wǎng)查是說(shuō)用10乘R 或10乘T的buff可以雙切，我們實(shí)驗(yàn)室沒(méi)有R和T，用K行不行呢，不性的話(huà)我讓老師買(mǎi)

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5樓2014-11-26 09:59:03

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引用回帖:

3樓: Originally posted by cuizk3 at 2014-11-25 15:48:29
buffer是不一樣的，另外最好選用同一個(gè)buffer

是啊是啊，不過(guò)現(xiàn)在不是沒(méi)有嘛，我就想知道用另一個(gè)公司的buff能不能行，關(guān)鍵是同樣的兩種酶，查到的公用buff竟然不一樣，所以就不太敢用

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6樓2014-11-26 10:01:24

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4樓: Originally posted by yang0071 at 2014-11-25 17:11:22
臨時(shí)急用的話(huà)，還是可以對(duì)付的
有些活性稍微弱些，有些基本無(wú)差別

倒也不急，就是想可以的話(huà)，就不用找老師買(mǎi)了

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7樓2014-11-26 10:03:04

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同一個(gè)公司都不一樣，

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以前舍不得花十分鐘看war3replay，現(xiàn)在卻可以花一下午去打dota，總覺(jué)得以前不夠努力，是人在越來(lái)越墮落，直到對(duì)生活妥協(xié)。

8樓2014-11-26 10:48:07

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西門(mén)吹雪170: 金幣+1, 鼓勵(lì)回帖交流 2014-11-27 19:59:25

看產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)，例如下面的
buffer M和H活性都是100， T是80，K是120

EcoR I.jpg

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9樓2014-11-26 18:38:42

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穿越米線king

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改成NEB 吧內(nèi)切酶統(tǒng)一換成NEB 的 buffer 方便的很都是統(tǒng)一的

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哼

10樓2014-11-27 11:45:35

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