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tianqingzn新蟲(chóng) (初入文壇)
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鎳柱純化蛋白遇到了些問(wèn)題，蛋白掛不上柱，怎么辦？？？？求解 已有1人參與
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| 大腸桿菌重組表達(dá)的蛋白，帶有his標(biāo)簽（N端和C端各一個(gè)），經(jīng)過(guò)超聲波破碎取上清，酶活很高，然后用鎳柱純化粗酶液，開(kāi)始用的結(jié)合緩沖液加有咪唑，最后的結(jié)果是蛋白沒(méi)掛柱，因?yàn)榈谝淮问盏囊后w酶活很高，最后用洗脫液收的液體沒(méi)有酶活。后來(lái)用不加咪唑的結(jié)合緩沖液重新純化蛋白，結(jié)果是掛上少許蛋白，而且最終收的液體測(cè)酶活酶活很低，該怎么優(yōu)化純化體系？？？？還是因?yàn)榈鞍椎膆is標(biāo)簽在蛋白里面包裹沒(méi)有暴漏出來(lái)，所以掛不上柱，求解，拜托給位前輩了�。。�！ |
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3樓2014-12-21 00:53:47
lpzl
木蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)
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2樓2014-12-18 16:39:07
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