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有關測序問題，為什么送菌液不直接送PCR產物 已有9人參與
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| 做基因的，為什么要割膠回收，連接轉化搖菌后送菌液，而不是直接用前面的PCR產物呢 |
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ls2046
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感謝參與，應助指數 +1
qaz139687: 金幣+4, ★★★★★最佳答案, 非常有幫助 2015-01-04 16:40:08
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| 在測序的過程中，兩端各有20-50bp，是無法準確閱讀的，參考性比較低，這是測序技術本身存在的問題，無法避免。連接載體后，使用載體上的序列作為測序引物，那么你的片段就能夠讀全了（可靠性低的序列會位于在載體上）。如果基因兩端的局部序列正確與否對你對結果的判斷沒有影響的話，完全可以用PCR產物直接測序（測序公司都要的），相反，則需要連接載體并用載體上的引物進行測序。我們做菌種大批量鑒定時都是使用PCR產物直接測序。因此，是連接載體還是用PCR產物，主要是看你測序的目的。ok。 |
6樓2015-01-04 09:30:22
2樓2015-01-02 14:39:17
guoliwang
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10樓2015-01-04 11:00:45
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