 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 5 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 7369 | 回復(fù): 5 | ||
| 當(dāng)前只顯示滿足指定條件的回帖，點擊這里查看本話題的所有回帖 | ||
[求助]
質(zhì)粒分別酶切均有正確條帶，但雙酶切只有一條條帶，這是怎么回事？ 已有3人參與
|
||
|
我的片段長度為5400bp左右，連接到POK12載體，載體長度為2400bp。由于長片段連接太難，所以我將片段一分為二，分別為3200bp和2600bp。分別連接入pok中。再將兩段連接起來。經(jīng)PCR鑒定為陽性的菌液提取質(zhì)粒進行酶切鑒定。片段1的雙酶切為MluI和NdeI，片段2的雙酶切為NdeI和EcoRV；同時使用MluI和EcoRV對整個片段進行酶切。第一行為片段1的雙酶切，第二行為片段2的雙酶切，均有目的條帶，第三行為整個片段的酶切，但是沒有pok質(zhì)粒條帶，只有單一的一條帶，三個酶切使用的是同一個質(zhì)粒，請問這是怎么回事？我到底是連上了還是沒連上啊……請大家?guī)兔匆幌路治鲆幌缕渲械膯栴}。Marker從上到下的大小為5000，3000，2000，1500，800，500，300 20150318-2.jpg |
回復(fù)此樓» 猜你喜歡
不合理蛙科研實驗之重金屬檢測：精準(zhǔn)篩查，守護健康與環(huán)境的防線
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實驗之“蛙測重金屬我背鍋三千”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
化學(xué)工程及工業(yè)化學(xué)論文潤色/翻譯怎么收費?
已經(jīng)有124人回復(fù)
-
不合理蛙科研實驗之“鼠逃三次我發(fā)三篇SCI”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
納米粒度分析
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
林科院林化所招收材料與化工專業(yè)碩士，坐標(biāo)南京
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
留學(xué)--博士招生
已經(jīng)有16人回復(fù)
-
化學(xué)工程，本211，求調(diào)劑，ab區(qū)不限
已經(jīng)有4人回復(fù)
-
邵陽學(xué)院食品與化學(xué)工程學(xué)院碩士調(diào)劑
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
湖北師范大學(xué)招調(diào)劑啦
已經(jīng)有3人回復(fù)
» 本主題相關(guān)價值貼推薦，對您同樣有幫助:
- 單酶切跟雙酶切電泳條帶一樣，且都比空質(zhì)粒跑的快，什么原因？
已經(jīng)有7人回復(fù)
- pet28a 空質(zhì)粒雙酶切圖像問題
已經(jīng)有15人回復(fù)
- 質(zhì)粒上的兩個酶切位點緊挨著，雙酶切能否切開
已經(jīng)有6人回復(fù)
- 質(zhì)粒，PCR產(chǎn)物雙酶切后膠回收不回來？求大神指導(dǎo)！
已經(jīng)有49人回復(fù)
- pPIC9表達質(zhì)粒XhoI/EcoRI雙酶切
已經(jīng)有7人回復(fù)
- Ecor Ⅰ和Hind Ⅲ雙酶切結(jié)果，目的條帶有，可是另一條帶比原來質(zhì)粒還要大，怎么解釋呢
已經(jīng)有6人回復(fù)
- 求助：質(zhì)粒酶切問題，質(zhì)粒被切飛了�。。�
已經(jīng)有24人回復(fù)
- 測序正確，但是酶切沒有條帶，而且重組質(zhì)粒位置不對
已經(jīng)有3人回復(fù)
- 雙酶切后，質(zhì)粒條帶彌散
已經(jīng)有13人回復(fù)
- PET28a重組質(zhì)粒酶切后有三條？
已經(jīng)有10人回復(fù)
- 連接效率低，重組質(zhì)粒無法酶切
已經(jīng)有5人回復(fù)
- 求去掉環(huán)狀質(zhì)粒中酶切位點和切后的質(zhì)粒連接問題？
已經(jīng)有7人回復(fù)
- 新人，請大俠賜教：構(gòu)建重組質(zhì)粒選擇雙酶切還是單酶切？
已經(jīng)有13人回復(fù)
- 求助--雙酶切連接構(gòu)質(zhì)粒
已經(jīng)有15人回復(fù)
- 重組質(zhì)粒單雙酶切結(jié)果一樣，奇怪了的……
已經(jīng)有15人回復(fù)
- 質(zhì)粒雙酶切。。。。。。。
已經(jīng)有5人回復(fù)
- 我構(gòu)建質(zhì)粒后酶切驗證的問題
已經(jīng)有13人回復(fù)
- 神奇的質(zhì)粒提取，花兒一樣神奇的單酶切跑膠！
已經(jīng)有34人回復(fù)
- 提取的質(zhì)粒跑出四條或者五條帶，但酶切后只有一條帶，是不是我的質(zhì)粒污染了
已經(jīng)有18人回復(fù)
- 十萬火急，重組質(zhì)粒酶切只有一條帶，測序有結(jié)果，但反復(fù)說我質(zhì)粒濃度很低
已經(jīng)有16人回復(fù)
- 環(huán)形質(zhì)粒酶切電泳圖分析求解
已經(jīng)有25人回復(fù)
- 質(zhì)粒是否需要酶切后再電泳？
已經(jīng)有9人回復(fù)
- 質(zhì)粒DNA用EcoR1和HindⅢ雙酶切后電泳圖，求鑒
已經(jīng)有6人回復(fù)
- 【求助/交流】質(zhì)粒DNA可以不通過酶切直接跑電泳檢測嗎？
已經(jīng)有24人回復(fù)
- 【求助/交流】質(zhì)粒，酶切前比酶切后跑的還快，神了？？！��！
已經(jīng)有15人回復(fù)
- 【求助/交流】質(zhì)粒單酶切后竟然兩條帶
已經(jīng)有32人回復(fù)
- 【求助/交流】求助、質(zhì)粒酶切沒有條帶？
已經(jīng)有18人回復(fù)
781055707
木蟲 (著名寫手)
- 應(yīng)助: 291 (大學(xué)生)
- 金幣: 3118.2
- 散金: 46
- 紅花: 19
- 帖子: 2030
- 在線: 579.3小時
- 蟲號: 3046113
- 注冊: 2014-03-13
- 性別: GG
- 專業(yè): 生物大分子結(jié)構(gòu)與功能
3樓2015-03-18 23:54:57
whdxhxy
木蟲 (小有名氣)
- 應(yīng)助: 16 (小學(xué)生)
- 金幣: 2579.7
- 紅花: 3
- 帖子: 243
- 在線: 119.4小時
- 蟲號: 849991
- 注冊: 2009-09-17
- 性別: MM
- 專業(yè): 腫瘤化學(xué)藥物治療
2樓2015-03-18 20:57:19
4樓2015-03-19 09:12:51
lomis
木蟲 (正式寫手)
- 應(yīng)助: 43 (小學(xué)生)
- 金幣: 1766.8
- 散金: 420
- 紅花: 25
- 帖子: 896
- 在線: 369.2小時
- 蟲號: 1884761
- 注冊: 2012-07-09
- 性別: GG
- 專業(yè): 生物材料
【答案】應(yīng)助回帖
★ ★
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
kx444555: 金幣+2, 鼓勵交流 2015-03-19 15:31:26
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
kx444555: 金幣+2, 鼓勵交流 2015-03-19 15:31:26
|
Double Digest Recommendations for MluI + NdeI: Digest in NEBuffer 3.1 at 37°C. 如果用NEB的酶，以后雙酶切，先在以下網(wǎng)站找用哪個buffer. http://international.neb.com/too ... ouble-digest-finder 如果換成Fermentas的酶，是只有一個buffer的，就不用擔(dān)心雙酶切buffer不合適。 |
5樓2015-03-19 11:25:35
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 求調(diào)劑 +9 | 家佳佳佳佳佳 2026-03-29 | 9/450 |
|
|---|---|---|---|---|
|
|
[有機交流] 考研調(diào)劑 +7 | watb 2026-03-26 | 7/350 |
|
|
[考研] 303求調(diào)劑 +4 | DLkz1314. 2026-03-30 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 329求調(diào)劑 +8 | 星野? 2026-03-26 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 求調(diào)劑 +7 | 青春裁為三截 2026-03-29 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 0703本科鄭州大學(xué)求調(diào)劑 +7 | nhj_ 2026-03-25 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 070300一志愿211，312分求調(diào)劑院校 +4 | 小黃鴨寶 2026-03-30 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 085601材料工程找調(diào)劑 +16 | oatmealR 2026-03-29 | 17/850 |
|
|
|
[考研] 332求調(diào)劑 +6 | Lyy930824@ 2026-03-29 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 一志愿哈爾濱工業(yè)大學(xué)材料與化工方向336分 +11 | 辰沐5211314 2026-03-26 | 11/550 |
|
|
|
[考研] 一志愿北京理工大學(xué)本科211材料工程294求調(diào)劑 +8 | mikasa的圍巾 2026-03-28 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 學(xué)碩274求調(diào)劑 +9 | Li李魚 2026-03-26 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 本科新能源科學(xué)與工程，一志愿華理能動285求調(diào)劑 +7 | AZMK 2026-03-28 | 11/550 |
|
|
|
[考研] 083000學(xué)碩274求調(diào)劑 +8 | Li李魚 2026-03-26 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 071000生物學(xué)求調(diào)劑，初試成績343 +7 | 小小甜面團 2026-03-25 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 317求調(diào)劑 +6 | 十閑wx 2026-03-24 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 070300求調(diào)劑306分 +4 | 26要上岸 2026-03-27 | 4/200 |
|
|
|
[考博] 26申博 +3 | 加油沖��！ 2026-03-26 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 0856調(diào)劑 +5 | 求求讓我有書讀?/a> 2026-03-26 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 0703化學(xué)一志愿南京師范大學(xué)303求調(diào)劑 +3 | zzffylgg 2026-03-24 | 3/150 |
|