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北京石油化工學(xué)院2026年研究生招生接收調(diào)劑公告

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cherry--

金蟲(chóng) (小有名氣)

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[求助] 菌落PCR目的條帶淺，測(cè)序回來(lái)不對(duì) 已有3人參與

菌落PCR有目的條帶但是很淺，送去測(cè)序回來(lái)與自己序列比對(duì)不上，到ncbi中blast后同源性都是果蠅等昆蟲(chóng)類的物種，不知是哪步出了問(wèn)題，求大神幫助

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【求助/交流】菌落PCR擴(kuò)出來(lái)的片段不是目的片段，咋辦��？？？？已經(jīng)有9人回復(fù)

1樓 2015-04-07 12:56:23

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18761615793

木蟲(chóng) (正式寫手)

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cherry--: 金幣+1 2015-04-07 18:03:39

既然自己到blast上比對(duì)過(guò)了是正確的了，說(shuō)明是測(cè)序出問(wèn)題了吧。。

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todayisdifficult，tomorrowismoredifficult，butthedayaftertomorrowisbeautiful

3樓2015-04-07 13:56:37

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sh_9153

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【答案】應(yīng)助回帖

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cherry--: 金幣+1, ★有幫助 2015-04-07 18:03:28

菌落PCR本來(lái)就是一個(gè)相對(duì)的驗(yàn)證結(jié)果，以便于自己縮小驗(yàn)證范圍，不能保證100%準(zhǔn)確，測(cè)序結(jié)果不正確，在你確定自己測(cè)序引物特異性和正確性的前提下，證明自己構(gòu)建有問(wèn)題

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2樓2015-04-07 13:50:52

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隨風(fēng)飄搖11

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cherry--: 金幣+2 2015-04-07 18:03:54

菌P不亮多半就是假陽(yáng)性的了，拿提的質(zhì)粒雙酶切試一試能切開(kāi)再送去測(cè)序

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天道酬勤

4樓2015-04-07 16:58:02

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引用回帖:

3樓: Originally posted by 18761615793 at 2015-04-07 13:56:37
既然自己到blast上比對(duì)過(guò)了是正確的了，說(shuō)明是測(cè)序出問(wèn)題了吧。。

比對(duì)不是正確的，我的基因是軟體動(dòng)物里的基因

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5樓2015-04-07 17:48:47

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