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王憶楠yn新蟲(chóng) (小有名氣)
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[求助]
pcr反應(yīng)cytb序列擴(kuò)不出原因?求分析! 已有2人參與
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本人本科生,目前做書(shū)虱的種內(nèi)鑒定。之前用引物擴(kuò)增ITS序列,電泳出現(xiàn)條帶,但是送去公司檢測(cè),說(shuō)亮帶里有比較亂,無(wú)法測(cè)序,F(xiàn)在用引物擴(kuò)增cytb序列,發(fā)現(xiàn)沒(méi)有條帶。 試劑 ddh2o 31.5ul dNTP 4ul buffer(Mg2+) 5ul 引物1 1.5ul 4個(gè)ep管分裝 每個(gè)ep12.5ul 引物2 1.5ul taq酶 0.5ul 模板 6ul (之前老師也做過(guò)幾次,同樣沒(méi)有條帶)退火溫度為40.0 41.2 43.9 47.7 52.6 56.5 58.8 60.0“℃。 模板有一年了,但是its 有條帶,很亮,只是無(wú)法測(cè)序。用新的模板可以擴(kuò)出很亮的條帶(cytb)。想求助是不是模板的問(wèn)題. cytb: F TATGTACTACCATGAGGACAAATAT R ATTACACCTCCTAATTATTAGGAAT |
新蟲(chóng) (小有名氣)
木蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)

新蟲(chóng) (小有名氣)
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