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[求助] 求助設(shè)計(jì)一種克隆方法已有1人參與

如題
剛剛接手一個(gè)新課題，要克隆來(lái)源于一種植物的一段基因到宿主里面，但是這個(gè)植物沒(méi)有被測(cè)過(guò)序，基因序列也不知道，只知道該基因編碼蛋白N端的10個(gè)氨基酸序列和蛋白質(zhì)的分子量大小(前人的工作)，新手第一次發(fā)帖，金幣不多，大恩不言謝。
P.S：我個(gè)人認(rèn)為應(yīng)該要通過(guò)mRNA弄RT-PCR，但是這個(gè)引物不好設(shè)計(jì)啊，該怎么辦呢？

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1樓 2015-04-20 00:34:46

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sandycool

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你好，請(qǐng)問(wèn)現(xiàn)在你做到哪一步了？

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7樓2015-10-24 10:02:37

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hanxiaominhu

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我想知道既然不知道基因序列，是如何知道的N端的10個(gè)序列的，使蛋白測(cè)序，質(zhì)譜，還是比較的同源物種。

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2樓2015-04-20 07:54:06

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引用回帖:

2樓: Originally posted by hanxiaominhu at 2015-04-20 07:54:06
我想知道既然不知道基因序列，是如何知道的N端的10個(gè)序列的，使蛋白測(cè)序，質(zhì)譜，還是比較的同源物種。

打的肽指紋譜

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3樓2015-04-20 09:12:14

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【答案】應(yīng)助回帖

感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1

那能不能多找上幾段，設(shè)計(jì)引物擴(kuò)增中間片段，再用RACE獲得全長(zhǎng)。

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4樓2015-04-20 10:39:48

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