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重組畢赤酵母分泌表達(dá)目的蛋白的問題
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目的蛋白由相同的兩條鏈通過二硫鍵連接組成，單鏈分子量在15KD。圖片中N為非還原，R為還原。經(jīng)還原后應(yīng)為相同的兩條鏈，在電泳圖上應(yīng)為一條帶。結(jié)果卻為2條帶! 為什么？如何解決？ 1. 有關(guān)pH、溫度、補(bǔ)料、蛋白水解酶抑制劑、維生素等的實(shí)驗(yàn)結(jié)果是如此；2. 去糖基化后，也是2條帶；3. 搖瓶、10L罐也是如此。 15%膠-N.jpg 15%膠-R.jpg |
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