 |
 |
 |
| 24小時(shí)熱門(mén)版塊排行榜 |
- >論壇更新日志 (1200)
- >考研 (171)
- >導(dǎo)師招生 (112)
- >蟲(chóng)友互識(shí) (81)
- >休閑灌水 (31)
- >碩博家園 (14)
- >招聘信息布告欄 (12)
- >考博 (12)
- >文獻(xiàn)求助 (8)
- >基金申請(qǐng) (6)
- >論文投稿 (4)
- >教師之家 (3)
- >找工作 (3)
- >職場(chǎng)人生 (2)
- >博后之家 (2)
- >有機(jī)資源 (2)
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 5 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 867 | 回復(fù): 2 | |||
| 本帖產(chǎn)生 1 個(gè) 博學(xué)EPI ，點(diǎn)擊這里進(jìn)行查看 | |||
| 當(dāng)前只顯示滿(mǎn)足指定條件的回帖，點(diǎn)擊這里查看本話(huà)題的所有回帖 | |||
502015088_新蟲(chóng) (初入文壇)
|
[求助]
質(zhì)粒pcr為陽(yáng)性，但酶切沒(méi)有出現(xiàn)目的片段
|
||
|
想請(qǐng)教一下各位蟲(chóng)友： 我把我需要的兩個(gè)基因連接到表達(dá)載體上（先連接的300bp大小的基因，測(cè)序正確后再連接的1885bp大小的基因），通過(guò)菌落PCR鑒定為陽(yáng)性的菌落在進(jìn)行質(zhì)粒提取，后 進(jìn)行質(zhì)粒PCR為陽(yáng)性。而對(duì)該質(zhì)粒進(jìn)行酶切，卻沒(méi)有出現(xiàn)目的條帶（1885kb）。這是什么原因呢？ pKSV7-p43-REC質(zhì)粒PCR.jpg 酶切 |
回復(fù)此樓» 猜你喜歡
【求調(diào)劑】新能源材料本科，一志愿211，初試321
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
材料考研調(diào)劑
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
材料調(diào)劑
已經(jīng)有12人回復(fù)
-
英一數(shù)一408，總分284，二戰(zhàn)真誠(chéng)求調(diào)劑
已經(jīng)有14人回復(fù)
-
085410 一志愿211 22408分?jǐn)?shù)359求調(diào)劑
已經(jīng)有4人回復(fù)
-
271求調(diào)劑
已經(jīng)有19人回復(fù)
-
385分 生物學(xué)（071000）求調(diào)劑
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
一志愿安徽大學(xué)計(jì)算機(jī)科學(xué)與技術(shù)學(xué)碩，331分求調(diào)劑
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
318求調(diào)劑，計(jì)算材料方向
已經(jīng)有8人回復(fù)
-
291求調(diào)劑
已經(jīng)有25人回復(fù)
» 本主題相關(guān)價(jià)值貼推薦，對(duì)您同樣有幫助:
- 質(zhì)粒分別酶切均有正確條帶，但雙酶切只有一條條帶，這是怎么回事？
已經(jīng)有5人回復(fù)
- 菌落PCR明顯有目標(biāo)條帶，酶切驗(yàn)證卻不對(duì)，測(cè)序也沒(méi)結(jié)果
已經(jīng)有6人回復(fù)
- 關(guān)于質(zhì)粒載體PCR目的基因片段大小的要求
已經(jīng)有10人回復(fù)
- 雙酶切的目的基因與質(zhì)粒連接不上怎么辦
已經(jīng)有25人回復(fù)
- 求助！雙酶切驗(yàn)證總切出來(lái)四條帶，請(qǐng)親們幫忙看看，非常著急��！謝謝大家了！
已經(jīng)有32人回復(fù)
- 質(zhì)粒，PCR產(chǎn)物雙酶切后膠回收不回來(lái)？求大神指導(dǎo)！
已經(jīng)有49人回復(fù)
- 質(zhì)粒PCR產(chǎn)物片段大小問(wèn)題
已經(jīng)有15人回復(fù)
- 關(guān)于PCR連接后菌液鑒定的問(wèn)題
已經(jīng)有18人回復(fù)
- 單酶切失敗。質(zhì)粒驗(yàn)證顯示正確，但是PCR驗(yàn)證與酶切驗(yàn)證出現(xiàn)很多問(wèn)題，麻煩大家解決下
已經(jīng)有4人回復(fù)
- 菌落PCR有目的條帶，重組質(zhì)粒提取PCR卻沒(méi)條帶，請(qǐng)問(wèn)是什么原因？
已經(jīng)有13人回復(fù)
- 菌液PCR的假陽(yáng)性是什么原因造成的？
已經(jīng)有7人回復(fù)
- 大神救命�。�！菌液PCR 出來(lái)酶切質(zhì)粒沒(méi)有目的條帶
已經(jīng)有5人回復(fù)
- PCR后，質(zhì)粒模板消失了，到底是什么原因啊？有沒(méi)有遇到同樣問(wèn)題的同學(xué)��？？
已經(jīng)有4人回復(fù)
- real time PCR NTC 陽(yáng)性擴(kuò)增
已經(jīng)有5人回復(fù)
- 載體和酶切片段連接的問(wèn)題
已經(jīng)有5人回復(fù)
- 目的片段與載體連接后無(wú)法檢測(cè)出
已經(jīng)有7人回復(fù)
- 菌液PCR沒(méi)東西，但是提完質(zhì)粒能跑出來(lái)?xiàng)l帶，為什么�。�
已經(jīng)有16人回復(fù)
- 質(zhì)粒PCR大小正確，可是雙酶切切不開(kāi)
已經(jīng)有8人回復(fù)
- 求助：重組質(zhì)粒酶切問(wèn)題！請(qǐng)大家?guī)臀医鉀Q一下，急！
已經(jīng)有7人回復(fù)
- 菌液PCR是陽(yáng)性，卻提不出來(lái)陽(yáng)性質(zhì)粒！求助
已經(jīng)有31人回復(fù)
- 雙酶切沒(méi)出現(xiàn)目的條帶，呈彌散型，有圖，求助。
已經(jīng)有7人回復(fù)
- 【求助/交流】質(zhì)粒DNA可以不通過(guò)酶切直接跑電泳檢測(cè)嗎？
已經(jīng)有24人回復(fù)
- 【求助/交流】連接轉(zhuǎn)化長(zhǎng)菌有質(zhì)粒，但是沒(méi)有目的片段，怎么回事？？
已經(jīng)有20人回復(fù)
502015088_
新蟲(chóng) (初入文壇)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 4
- 帖子: 4
- 在線: 3.5小時(shí)
- 蟲(chóng)號(hào): 3425024
- 注冊(cè): 2014-09-18
|
蟲(chóng)友，你好！我說(shuō)一下我的具體實(shí)驗(yàn)步驟，你幫我看一下疑問(wèn)出現(xiàn)在哪里。 首先，我用EcoRI和BamHI酶切我的上游基因（300bp）和質(zhì)粒骨架（P），連接后轉(zhuǎn)化到大腸桿菌中，挑單菌落進(jìn)行菌落PCR陽(yáng)性后在提質(zhì)粒(P1)進(jìn)行質(zhì)粒PCR，結(jié)果為陽(yáng)性，送出去測(cè)序，測(cè)序結(jié)果正確。后再用BamHI和HindIII對(duì)質(zhì)粒(P1)和我的下游基因（1885bp)進(jìn)行酶切，連接后轉(zhuǎn)化到大腸桿菌中，挑單菌落進(jìn)行菌落PCR陽(yáng)性后在提取質(zhì)粒（P3），質(zhì)粒PCR為陽(yáng)性（圖一）。后送出去測(cè)序說(shuō)測(cè)序沒(méi)有信號(hào)，測(cè)序用的是上游基因的上游引物和下游基因的下游引物。后對(duì)P3質(zhì)粒進(jìn)行酶切，沒(méi)有下游基因（1885bp片段）。 |
3樓2015-06-01 10:34:39
l1012003
銀蟲(chóng) (小有名氣)
- 博學(xué)EPI: 1
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 639.9
- 紅花: 1
- 帖子: 57
- 在線: 18.5小時(shí)
- 蟲(chóng)號(hào): 3033746
- 注冊(cè): 2014-03-10
- 性別: GG
- 專(zhuān)業(yè): 生物大分子結(jié)構(gòu)與功能
2樓2015-05-30 13:46:06
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 298求調(diào)劑 +4 | 什么是胖頭魚(yú) 2026-03-30 | 6/300 |
|
|---|---|---|---|---|
|
|
[考研] 273求調(diào)劑 +19 | 李芷新1 2026-03-31 | 19/950 |
|
|
[考研] 【求調(diào)劑】085601材料工程專(zhuān)碩 | 總分272 | +10 | 腳滑的守法公民 2026-03-27 | 10/500 |
|
|
|
[考研] 311求調(diào)劑 +11 | 藍(lán)月亮亮 2026-03-30 | 11/550 |
|
|
|
[考研] 085601一志愿中山大學(xué)深圳材料工程330求調(diào)劑 +6 | pipiver 2026-03-30 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 085600，材料與化工321分，求調(diào)劑 +11 | 大饞小子 2026-03-27 | 11/550 |
|
|
|
[考研] 生物學(xué)327，求調(diào)劑 +4 | 書(shū)上的梅子 2026-04-01 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 一志愿南昌大學(xué)324求調(diào)劑 +7 | hanamiko 2026-03-30 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 考研材料工程351分調(diào)劑 +5 | 整個(gè)好的 2026-03-31 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 求調(diào)劑，一志愿 南京航空航天大學(xué) ，080500材料科學(xué)與工程學(xué)碩，總分289分 +10 | @taotao 2026-03-29 | 10/500 |
|
|
|
[考研] 322求調(diào)劑 +4 | 熹僖XX 2026-03-31 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 一志愿西交大080500材料學(xué)碩349 +6 | jqx1258 2026-03-31 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 求化學(xué)調(diào)劑 +12 | wulanna 2026-03-28 | 12/600 |
|
|
|
[考研] 313求調(diào)劑 +6 | 賣(mài)個(gè)關(guān)子吧 2026-03-31 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 083000環(huán)境科學(xué)與工程調(diào)劑，總分281 +4 | 橙子（勝意） 2026-03-30 | 4/200 |
|
|
|
[考研]
 105500藥學(xué)求調(diào)劑，一志愿山東大學(xué)藥學(xué)，348分
+3
|
gr哈哈哈 2026-03-28 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 356求調(diào)劑 +4 | gysy?s?a 2026-03-28 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 調(diào)劑考研 +3 | 王杰一 2026-03-29 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 283求調(diào)劑 +3 | A child 2026-03-28 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 292求調(diào)劑 +4 | 求求了收下我吧?/a> 2026-03-26 | 4/200 |
|