 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 5 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 2317 | 回復: 30 | ||
| 當前只顯示滿足指定條件的回帖，點擊這里查看本話題的所有回帖 | ||
[求助]
各位蟲友能幫忙分析下我提取的果實RNA問題可能出在哪嗎？ 已有9人參與
|
||
|
操作步驟 1) 取 800ul 提取緩沖液加入 2ml 離心管中，預熱至 65℃ 2) 取新鮮樣品放入研缽，在液氮中迅速研磨成粉末狀。 3) 迅速將 50-100mg 粉末狀樣品轉(zhuǎn)入預熱的提取緩沖液中， 渦旋振蕩器混勻，65℃水浴 10min，每隔 2min 混勻一次。 4) 水浴結(jié)束后， 冷卻至室溫。 5) 向離心管中加入等體積氯仿/異戊醇(24:1)， 渦旋振蕩器充分混勻，冰浴10min。 6) 離心管在 4℃下 12000×g 離心 10min。 7) 取上清，轉(zhuǎn)入新的 2ml 離心管，重復操作(5)、 (6)。注：如果中間層仍有物質(zhì)，可以繼續(xù)重復步驟（ 5）和（ 6），直至中間層較干凈為止（但最多抽提 4 次，過柱時抽提 3 次，否組次數(shù)太多會降解）。 8) 取上清，轉(zhuǎn)入新的 1.5ml 離心管中， 加入 1/3 體積的 8M LiCl，混勻，加入等體積的異丙醇，混勻， 放入-20℃冰箱1小時。 9) 4℃， 12000×g 離心 15 min。棄掉上清，注意不要倒出沉淀。 10) 向 RNA 沉淀中加入 1ml 75％乙醇， 漩渦振蕩器上振蕩混勻 5s， 4oC， 7500×g離心 5min，棄上清。 11) 4oC， 7500×g 離心 1min，用槍頭小心吸棄多余液體。 提取了很多次，效果都不好！懇請各位幫忙分析一下！圖中間是mark，右邊是實驗提取的RNA。是不是RNA降解的太厲害？還是DNA降解所出現(xiàn)的拖尾現(xiàn)象？ IMG_2443.JPG |
回復此樓» 猜你喜歡
不合理蛙科研實驗中的趣事：實驗器材的 “烏龍”
已經(jīng)有0人回復
-
不合理蛙科研實驗中的趣事：和實驗材料的 “斗智斗勇”
已經(jīng)有0人回復
-
化學工程及工業(yè)化學論文潤色/翻譯怎么收費?
已經(jīng)有161人回復
-
蛋白質(zhì)檢測：精準分析，解鎖生物分子的密碼
已經(jīng)有0人回復
-
不合理蛙科研實驗之小鼠實驗：嚴謹設計，解析生命機制的重要載體
已經(jīng)有0人回復
-
不合理蛙科研實驗之重金屬檢測：精準篩查，守護健康與環(huán)境的防線
已經(jīng)有0人回復
-
不合理蛙科研實驗之“蛙測重金屬我背鍋三千”
已經(jīng)有0人回復
-
不合理蛙科研實驗之“鼠逃三次我發(fā)三篇SCI”
已經(jīng)有0人回復
-
納米粒度分析
已經(jīng)有3人回復
-
林科院林化所招收材料與化工專業(yè)碩士，坐標南京
已經(jīng)有0人回復
» 本主題相關價值貼推薦，對您同樣有幫助:
- 第一次提RNA,請各位前輩指點！
已經(jīng)有4人回復
- 提取的RNA電泳后條帶
已經(jīng)有6人回復
- 求助各位大神啊 關于植物果實RNA提取過程中碾碎問題
已經(jīng)有4人回復
- 求問提RNA的樣品需要加入Trizol保存嗎？
已經(jīng)有5人回復
- Trizol 法怎么提取高質(zhì)量RNA
已經(jīng)有22人回復
- 幫忙看一下提的真菌RNA 跑的電泳 謝謝啦~~~
已經(jīng)有17人回復
- 總RNA電泳圖求分析
已經(jīng)有7人回復
- 請問在提RNA的時候，用氯仿：異戊醇=24:1，還是用氯仿？
已經(jīng)有8人回復
- 細胞RNA提取一直失敗 ，什么原因？
已經(jīng)有8人回復
- 姜的總RNA提取，電泳只有一條帶
已經(jīng)有29人回復
- Trizol提取的RNA有粘稠，跑膠有amear，怎么處理？
已經(jīng)有8人回復
- 請大家?guī)臀曳治鱿挛姨岬馁|(zhì)粒怎么這么多條帶呀?
已經(jīng)有10人回復
- RNA提取電泳效果不好
已經(jīng)有12人回復
- 有關細胞總RNA提取
已經(jīng)有16人回復
- 提取的RNA 濃度低還能做電泳檢測質(zhì)量嗎？
已經(jīng)有3人回復
- Trizol 法 RNA提取失敗 請蟲友幫忙分析下 什么原因?該怎么辦吖
已經(jīng)有18人回復
- RNA電泳圖分析
已經(jīng)有10人回復
- 植物RNA提取電泳圖，求解析！
已經(jīng)有3人回復
- 提取RNA后，反轉(zhuǎn)錄后用β-actinpcr很多條帶
已經(jīng)有20人回復
- 提取的rna濃度只有60ng/ul，影響逆轉(zhuǎn)錄嗎，請好心蟲友指點
已經(jīng)有17人回復
- 植物RNA提取試劑盒
已經(jīng)有9人回復
- 質(zhì)粒DNA提取成了這樣，請大家?guī)兔Ψ治鲆幌?/a>
已經(jīng)有27人回復
9樓2015-06-17 08:47:54
2樓2015-06-16 20:17:46
3樓2015-06-16 21:50:04
Neo2000
木蟲 (著名寫手)
- 應助: 639 (博士)
- 金幣: 8720.2
- 紅花: 37
- 帖子: 1700
- 在線: 269.3小時
- 蟲號: 322365
- 注冊: 2007-03-11
- 專業(yè): 生物物理、生物化學與分子
4樓2015-06-16 23:34:49
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 298-一志愿中國農(nóng)業(yè)大學-求調(diào)劑 +11 | 手機用戶 2026-03-17 | 12/600 |
|
|---|---|---|---|---|
|
|
[考研] 求材料，環(huán)境專業(yè)調(diào)劑 +3 | 18567500178 2026-03-18 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 279分求調(diào)劑 一志愿211 +17 | chaojifeixia 2026-03-19 | 19/950 |
|
|
|
[考研] 327求調(diào)劑 +5 | prayer13 2026-03-23 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 一志愿重慶大學085700資源與環(huán)境，總分308求調(diào)劑 +7 | 墨墨漠 2026-03-23 | 8/400 |
|
|
[考研] 求調(diào)劑一志愿武漢理工大學材料工程（085601） +3 | WW.' 2026-03-23 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 石河子大學（211、雙一流）碩博研究生長期招生公告 +3 | 李子目 2026-03-22 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 306求調(diào)劑 +5 | 來好運來來來 2026-03-22 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 324求調(diào)劑 +6 | lucky呀呀呀鴨 2026-03-20 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 303求調(diào)劑 +5 | 安憶靈 2026-03-22 | 6/300 |
|
|
|
[考博] 招收博士1-2人 +3 | QGZDSYS 2026-03-18 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 286求調(diào)劑 +10 | Faune 2026-03-21 | 10/500 |
|
|
|
[考研] 化學調(diào)劑 +5 | yzysaa 2026-03-21 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 0703化學297求調(diào)劑 +3 | Daisy☆ 2026-03-20 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 一志愿重慶大學085700資源與環(huán)境總分308求調(diào)劑 +7 | 墨墨漠 2026-03-20 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 085700資源與環(huán)境308求調(diào)劑 +12 | 墨墨漠 2026-03-18 | 13/650 |
|
|
|
[考研] 321求調(diào)劑 +9 | 何潤采123 2026-03-18 | 11/550 |
|
|
|
[考研] 求調(diào)劑 +3 | @taotao 2026-03-20 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 085410人工智能專碩317求調(diào)劑（0854都可以） +4 | xbxudjdn 2026-03-18 | 4/200 |
|
|
|
[考博] 26博士申請 +3 | 1042136743 2026-03-17 | 3/150 |
|