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小木蟲論壇-學術(shù)科研互動平臺 » 生物醫(yī)藥區(qū) » 生物科學 » 層析/純化 » 包涵體復性問題
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chenyuanli木蟲 (小有名氣)
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[求助]
包涵體復性問題 已有2人參與
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最近在做包涵體復性，嘗試了用稀釋復性，從4M Urea開始復性，ph8.0,蛋白的等電點在6.6附近，透析至2M時有沉淀產(chǎn)生，蛋白濃度在0.3mg/ml. 另外，做了稀釋復性，向目標蛋白中逐滴加入稀釋復性液，4℃，時間14h左右，伴隨緩慢攪拌，終濃度為0.1mg/ml，沒有沉淀產(chǎn)生，復性結(jié)束后，體積大，濃度低。該情況下，如何進一步處理，得到高濃度，小體積的目標蛋白溶液，是過柱子富集，超濾濃縮。。。？在這些過程中會產(chǎn)生沉淀嗎？如何有效控制  |
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惡魔的左眼
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4樓2015-08-07 21:45:26
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