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chenyuanli木蟲 (小有名氣)
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[求助]
包涵體復(fù)性問題 已有2人參與
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最近在做包涵體復(fù)性，嘗試了用稀釋復(fù)性，從4M Urea開始復(fù)性，ph8.0,蛋白的等電點(diǎn)在6.6附近，透析至2M時有沉淀產(chǎn)生，蛋白濃度在0.3mg/ml. 另外，做了稀釋復(fù)性，向目標(biāo)蛋白中逐滴加入稀釋復(fù)性液，4℃，時間14h左右，伴隨緩慢攪拌，終濃度為0.1mg/ml，沒有沉淀產(chǎn)生，復(fù)性結(jié)束后，體積大，濃度低。該情況下，如何進(jìn)一步處理，得到高濃度，小體積的目標(biāo)蛋白溶液，是過柱子富集，超濾濃縮。。。？在這些過程中會產(chǎn)生沉淀嗎？如何有效控制  |
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4樓2015-08-07 21:45:26
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