大家好，我這邊最近做qPCR絕對定量遇到一個現象，就是qPCR的結果和我的菌液鏡檢結果相差1~2個數量級，下面把結果和實驗中的一些參數給大家看看，請幫忙分析一下。我的qPCR結果顯示我菌液濃度約為8E+11copies/ml，顯微鏡檢結果約為3E+9個/ml。...

我的材料證實是有光毒性的，產活性氧并且產率不低，材料濃度，光照功率都經過體外實驗驗證過的，可用CCK-8檢測細胞基本沒死，顯示無毒是什么原因�。恐貜土藘纱味际秋@示無毒的。

RNA跑了好幾次膠，但條帶都沒分開，有沒有RNA跑膠跑出來的大佬，分享一下經驗。

免疫小白，老板突然給了我兩篇paper讓我研究用elisa測細胞因子，現在有一個問題：取了脾組織然后制備了單細胞懸液以后，還需要再接著培養(yǎng)嗎？還是直接稀釋好濃度就可以當做sample用試劑盒做了？我們的實驗目的應該是探究做完別的實驗的老鼠免疫因子的表達情況，因...

投稿BMC，由于對GeneOntology富集分析不太了解，所以不知該怎么回復審稿人才好？其中一位審稿人提出Question2:Theenrichmentanalysisisunclear,inparticularasregardstheGOclassific...

菜鳥又來問問題了……如果只根據PCR之后終點的熒光強度來判定陰陽，出錯的概率有多大呢？會出現陰性的熒光強度高于陽性的情況嗎？據我所知，終點法只能半定量，而且不太準，所以后來有了實時定量熒光PCR，但是如果只是定性呢？可以就用終點法嗎？

菜鳥又來問問題了……如果只根據PCR之后終點的熒光強度來判定陰陽，出錯的概率有多大呢？會出現陰性的熒光強度高于陽性的情況嗎？據我所知，終點法只能半定量，而且不太準，所以后來有了實時定量熒光PCR，但是如果只是定性呢？可以就用終點法嗎？

菜鳥又來問問題了……如果只根據PCR之后終點的熒光強度來判定陰陽，出錯的概率有多大呢？會出現陰性的熒光強度高于陽性的情況嗎？據我所知，終點法只能半定量，而且不太準，所以后來有了實時定量熒光PCR，但是如果只是定性呢？可以就用終點法嗎？

最近想要做植物內某個基因的沉默，一直糾結于用Crispr，還是用傳統(tǒng)的RNAi技術，我的目的想要看該基因敲低后的相關生理狀態(tài)，并不一定非要敲除，擔心徹底敲除某個基因會引起其他生理反應，而不是我預期的生理現象。因此，想求教各位大神，這兩個技術手段的優(yōu)缺點，針對我...

最近在做DNA鏈置換方面的實驗，反應在PBS中進行，其中鏈A、T、B的濃度試了兩組，10nM、1nM、5nM一組，50nM、1nM、25nM一組。鏈A和鏈T結合，鏈B可以與鏈A結合從而將鏈T置換下來，從而鏈T能夠繼續(xù)參與反應，實現鏈T量的放大。但是實驗結果發(fā)現...

求定點突變單個堿基的質粒構建的原理！如果采用一步法進行定點突變，設計引物時將突變堿基設計在中間，這樣的話PCR為什么會得到有交錯缺口的突變質粒？求在該種情況下PCR變性退火延伸時的圖！

求助各位大佬，本人在做分子信標識別（MB）和信號放大方面的工作，T是靶標核酸鏈，B是理論上能將與MB結合的T替換下來，游離的T再次與MB反應，以實現T的量放大的效果。具體步驟如下：1、MB探針溶于緩沖溶液（10mMTris-HCl，2mMEDTA，5mMMgC...

請問下，那種多重序列比對結果，輸出時候，相同序列顯示星號的結果，DNAMAN軟件能做到嗎

請問各位，現在天冷，復蘇好的細胞需要20℃恒溫物流，可是我并不知道可以送恒溫物流的企業(yè)，請各位有經驗的幫幫忙。謝謝大家。

我從葉片中克隆了我要的目的基因的啟動子，送測結果和基因組的結果有一段11bp的缺失，想問問各位大佬，我所克隆的這個啟動子能繼續(xù)下一步構載體嗎？元件預測幾乎一致

更改酶切位點進行PCR，然后將PCR產物與載體骨架進行連接，獲得改變了酶切位點的載體：有兩個問題：以XbaI為例，酶切位點在CTCGAG的C和T之間，更改酶切點的的時候，是只在引物一段加上“TCGAG”還是要加上“CTCGAG”，即要不要加酶切位點之前的堿基C...

crispr相關的一篇文獻，外行實在是看得不是很懂，有償求助��！

學生有一個疑問，基因過長的話可以分段合成，分段的基因如何連接在一起，如果設計引物的時候加了酶切位點，用連接酶的話，基因中豈不是多了幾對酶切位點的堿基序列嗎

【上海技術交易所招聘】上海技術交易所成立于1993年，是由國家科技部和上海市人民政府共同組建的我國首家國家級常設技術市場，國家級技術轉移示范機構。【招聘】成果轉化項目實習生、應屆生、富有工作經驗的人士工作內容：1、記錄科技成果產業(yè)化狀況，對科技成果形成技術先進...

請問CRISPR雙質粒系統(tǒng)，兩部轉化，一次是轉入含Cas9蛋白的質粒，一次是轉入含target的質粒，這兩部轉化都需要電轉化嗎？請問這兩部轉化用電轉和化轉有什么區(qū)別呢？謝謝！

各位請問兩種質粒共同轉化表達菌株BL21（DE3）為什么誘導不出帶來呢？復制子不一樣，抗性不一樣，菌液pcr都有帶，用的PH8.0TrisHCl裂解菌體，BL21condon稀有密碼子對照菌株同樣結果，一個蛋白誘導出來了，想要的目的蛋白沒有誘導出來，實在想不通...

各位蟲友，請問Infusion克隆與gibson克隆有什么區(qū)別？

RT，具體情況就是DNA是訂制的，但是標記的熒光染料使我們自己合成的，可以修飾羧基，氨基，羥基這種集團，想問一下，一般DNA怎么標記這種熒光染料，對DNA和染料各自有什么要求，標記完成之后，又該怎么提取DNA用于接下來的實驗呢，我需要液相就可以，濃度啥的怎么確...

RT-qPCR實驗組與對照組之前如何進行差異性分析，

某篇文章中，同一張膜的兩個蛋白使用了同一個內參，但是把兩個蛋白分（同張膜）成了兩張圖說明問題，下面都跟著內參（同張膜上的同條內參），這樣算不算學術不端啊？有點害怕舉個例子差不多像這樣↓---a蛋白---b蛋白---x內參→---x內參（兩條x內參用了同一張圖片...

酵母雙雜驗證的時候AD-BD二缺長的很好但是四缺長了很多，但是一直長不大是怎么回事，一直都是一毫米直徑那種大小，是什么原因呢

構建好測序沒有問題的質粒在做了一段時間的實驗后，重新轉化，為什么菌P結果會一直出現其他條帶？一條是目標大小的條帶，一條是空載大小的條帶，在兩者之間還有一條很弱的條帶。

同源重組雙交換法獲得敲除突變株，傳代純化太多次會不會影響后期發(fā)酵?