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關(guān)于dna變性退火的問題

chengshuya
兩條單鏈dna,想復(fù)性成雙鏈結(jié)構(gòu)。想問下,95℃加熱后應(yīng)該選擇緩慢冷卻還是,冰上快去冷卻?這兩者有什么區(qū)別?
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求助蛋白純化!!蛋白過不下來怎么辦呀!

ym9364
目的蛋白分子量53Kd,等電點(diǎn)5.05,ph7.2-7.4最穩(wěn)定,我用36-86mmol/lNaH2PO4緩沖液洗脫的!ph調(diào)的7.3但是都沒有條帶,是怎么回事埃上樣前的...
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CRISOR/cas9 設(shè)計sgRNA

冰點(diǎn)文庫
本人在做山羊的基因敲除,現(xiàn)在有一段4308bp的堿基序列,需要設(shè)計sgRNA,遇到一些問題1,目前大部分sgRNA設(shè)計網(wǎng)站,都會限制輸入的堿基數(shù)量為2000,我是否可以把我的堿基分段設(shè)計,然后選取其中特異性最高的sgRNA2,若有能直接輸入4000+堿基進(jìn)行s...
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southern blot 條帶微弱,請老師們指點(diǎn)

忒男
制作探針的DNA片段長500bp,探針效率第五個點(diǎn)清晰,第六個點(diǎn)若隱若現(xiàn)。轉(zhuǎn)膜用的恒壓法,顯色放置的時間有點(diǎn)長謝謝批注2020-08-04155120.png批注2020...
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 生物實(shí)驗(yàn)技術(shù)資源(測序、PCR、細(xì)胞學(xué)等18大技術(shù)),從入門到精通

yanlang115
2019新版生物醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)資源大合集,將高分實(shí)驗(yàn)方案設(shè)計、最新高分文獻(xiàn)詳細(xì)剖析、分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)、細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)、引物設(shè)計、最新pcr相關(guān)技術(shù)、最規(guī)范實(shí)驗(yàn)技術(shù)實(shí)操視頻等十二大類實(shí)驗(yàn)相關(guān)資源進(jìn)行完美的搜集與整合!大家好好學(xué),發(fā)sci指日可待!干貨內(nèi)容以上為概...
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剛做轉(zhuǎn)化不太順利,求指導(dǎo)

彼岸流年714
轉(zhuǎn)化失敗來網(wǎng)上逛一圈找找原因,老看到評論下看到一句話,轉(zhuǎn)個空載體看看能長就是連接的問題,我咋這么看不懂這句話呢[Lasteditedby彼岸流年714on2020-8-5at20:29]
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電泳時電泳槽為什么會有蒸汽

sky0210
電泳時電泳槽為什么會有蒸汽,之前沒這種現(xiàn)象,求大神指導(dǎo)……
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這3年,作為生信分析員我都干了啥?接下來3年干啥?

leafy飛
用3年的工作日志,做了一些數(shù)據(jù)分析,給比我年輕的后浪做個參考,順便求一波關(guān)注'https://www.bilibili.com/video/BV1vi4y137Us'現(xiàn)在有點(diǎn)迷茫,請大蝦們給點(diǎn)職業(yè)發(fā)展建議!
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酶的濃度怎么測

鄭凱開開
請問我想測透明質(zhì)酸酶的濃度,有沒有一種快速的,靠譜的,大家廣泛承認(rèn)的方法,來表征酶的濃度
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現(xiàn)在在做橡膠樹啟動子區(qū)域擴(kuò)不出來求大佬幫我看下

AmaliaWong
兩個啟動子AT含量高達(dá)75.6%和79.6%的啟動子然后做了梯度Pcr一個都沒出來。。。求各位大佬支支招用的TAKARALaTaq酶
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請教大神挖掘新酶的問題

分子小雪
我用ncbi挖掘出新的木糖苷酶,blast顯示是gh43家族的,這個準(zhǔn)么,還是具體是什么酶需要自己分析呀,怎么分析它到底是不是木糖苷酶,屬于什么家族呀,我今天測新酶對pnpx的酶活,發(fā)現(xiàn)無活力。我還需要怎么測活呢?希望大神能幫幫我,謝謝&#128591...
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谷氨酸棒桿菌基因敲除

你,可以的!
有沒有做谷氨酸棒桿菌的大神呀?基因敲除敲不掉,求解。。。
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DNA 聚丙烯凝膠電泳圖 如何改善

yangxiaomo
做了一周聚丙烯酰胺凝膠電泳,調(diào)節(jié)了膠濃度、上樣量,做出來的圖都很丑,請各位大牛指點(diǎn)下該如何改善?1、泳道歪歪扭扭2、條帶不直3、一直用100V電壓,是否需要提高電壓4、上...
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病毒裂解液的配方

大燕子啊
各位大神,求病毒裂解液的配方,不同病毒裂解液體系一樣嗎?樣本類型為呼吸道感染類的拭子樣本。謝謝啦
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分享分子生物學(xué)和分子遺傳學(xué)最經(jīng)典的名著——《基因X》中文版PDF版

yanlang115
20多年來經(jīng)久不衰的經(jīng)典名著,看成分子生物學(xué)的國際書,免費(fèi)分享給大家!
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各位小伙伴會分析CDpro軟件的結(jié)果嗎

ly0923
剛學(xué)會CDpro,得到的結(jié)果不知道啥意思。麻煩各位能給我說說嗎?謝謝哈
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用PET46-,表達(dá)his融合蛋白,考馬斯亮藍(lán)可以看到條帶,western檢測不出來

琳兒
用PET46-,表達(dá)his融合蛋白,考馬斯亮藍(lán)可以看到表達(dá)條帶,western檢測HIS標(biāo)簽,卻雜不出來,求幫助,已經(jīng)做了很多次了,就是雜不出來,蛋白也重新純化過了兩次了,考馬斯亮藍(lán)染色帶是沒問題的,western用His抗體就是檢測不到條帶,加了一個陽性對照...
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電轉(zhuǎn)杯表面氧化

婷寶寶2013
電轉(zhuǎn)杯表面被氧化,發(fā)黑,還能繼續(xù)電轉(zhuǎn)化使用嗎?
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GFP亞細(xì)胞定位

豆子喔
GFP必須轉(zhuǎn)入的是基因的CDS區(qū)嗎可以加入UTR區(qū)嗎起始密碼子附近GC含量高無法設(shè)置引物可以增加3的倍數(shù)的UTR區(qū)嗎
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酶切連接不成功

HK驅(qū)魔者
酶切連接總是沒有陽性子,我的基因是菌p得來的,三個基因,我用overlap連起來總長3900bp,載體是petduet-1,酶切位點(diǎn)ecor1和hind3做了一個多月了,試過各種連接比例。我現(xiàn)在在想會不會是我目的基因有什么問題?
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序列比對分析,是同一基因的剪切子

zd5352
請教各位,從轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)中得到2個contig序列,氨基酸比對分析一致性94%,這有可能是同一基因的剪切子嗎?比對1.jpg
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T0代有表型,后面又消失了,怎么回事?

yuying0421
水稻中敲出一個基因,T0代表型明顯,到T2代表型就消失了,怎么回事?是自己修復(fù)了嗎?
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大腸桿菌BL21(DE3)整合表達(dá)

2339773049
有人做過在E.coliBL21(DE3)染色體上的整合表達(dá)嗎,想請教一下選擇了什么位點(diǎn)整合,表達(dá)量怎么樣,謝謝
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pMA5質(zhì)粒圖譜怎么看

2339773049
請教一下大家:1、pMA5質(zhì)粒的kan基因序列為什么不是以起始密碼子開頭?2、該抗性基因上下游的啟動子和終止子位于哪里?3、想p下來這段抗性基因在大腸中表達(dá),會不會因?yàn)閜...
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為什么pk18sacB質(zhì)粒連接同源片段后轉(zhuǎn)化大腸難以獲得轉(zhuǎn)化子

秦志杰
為什么pk18sacB質(zhì)粒連接同源片段后轉(zhuǎn)化大腸難以獲得轉(zhuǎn)化子
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激酶抑制劑測試第二章節(jié)---激酶抑制劑分類

開水中游泳
蛋白激酶抑制劑按照是否與ATP結(jié)合位點(diǎn)的“鉸鏈區(qū)”結(jié)合及是否結(jié)合激酶的活性構(gòu)象可分為4種類型(見表1)。其中I型和II型的抑制劑構(gòu)成了最常見的ATP競爭性抑制劑。在過去的...
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LAMP實(shí)驗(yàn)陰性也有擴(kuò)增

大頭er_崽
遇到的問題簡直令我頭禿,上周本來測試的一個引物好好的,只有加了模板的陽性才能擴(kuò)增,陰性完美對照。但是這周開始,這個引物也不行啦,陰性也開始出現(xiàn)擴(kuò)增了,加了UDG也不能很好的解決。我用的是鈣黃綠素和HNB來顯色的,所以沒有開過蓋子,大半個月顯色問題終于解決,但是...
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TAQ酶廠商是怎么確定酶活性的?

aliaa2019
有沒有廠商回答一下?熒光定量PCR?定性PCR?esy-023635429.jpg
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單克隆抗體制備方法上的一點(diǎn)困惑

彼岸是水
本人非生物專業(yè),最近學(xué)習(xí)抗體相關(guān)知識,遇到如下問題,還希望專業(yè)人士給解惑:抗體制備的方法一:B細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合、HAT培養(yǎng)基培養(yǎng)、雜交瘤細(xì)胞的篩選及克壟小鼠腹水/體外培養(yǎng)制得單克隆抗體。方法二、該方法涉及到細(xì)胞株構(gòu)建議,流程則是細(xì)胞株構(gòu)建(具體涉及到載體構(gòu)...
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微生物系統(tǒng)發(fā)育

jiezai
我的微生物16srRNA基因測序結(jié)果在blast上比對后的結(jié)果顯示微生物和terrisporobacter同源性高,微生物樹圖畫出來確很奇怪?blast比對.png樹圖....
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