 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 5 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 3897 | 回復(fù): 15 | ||
| 當(dāng)前只顯示滿足指定條件的回帖，點(diǎn)擊這里查看本話題的所有回帖 | ||
小周鐵桿木蟲(chóng) (著名寫(xiě)手)
|
[求助]
重疊延伸PCR引物合成求助
|
|
|
最近想把兩個(gè)DNA片段連起來(lái)，想用SOE PCR的方法，看了半天引物設(shè)計(jì)時(shí)都沒(méi)有搞明白。 假設(shè)我的片段A序列為：5’CGA GGATCCAG CATG GAG ACA GAC ACA CTC CTG CTA TGG GTA CTG ........ ACT GGT GACCAT CAT CAC CAT CAC CAT3’ B片段的序列為：5’GACGATGACGACAAGccagtaccccc................agggctcttcggcaaatgtaaGTCGACCAGG3’ 希望的結(jié)果為A在前B在后： 5’CGA GGATCCAG CATG GAG ACA GAC ACA CTC CTG CTA TGG GTA CTG ........ ACT GGT GACCAT CAT CAC CAT CACCATGACGATGACGACAAGccagtaccccc................agggctcttcggcaaatgtaaGTCGACCAGG3’ 中間兩條引物該怎樣設(shè)計(jì)呢？謝謝 |
回復(fù)此樓» 猜你喜歡
323求調(diào)劑
已經(jīng)有6人回復(fù)
-
一志愿北京化工大學(xué) 070300 學(xué)碩 336分 求調(diào)劑
已經(jīng)有4人回復(fù)
-
352求調(diào)劑
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
一志愿東華大學(xué)化學(xué)070300，求調(diào)劑
已經(jīng)有8人回復(fù)
-
277材料科學(xué)與工程080500求調(diào)劑
已經(jīng)有7人回復(fù)
-
317求調(diào)劑
已經(jīng)有18人回復(fù)
-
293求調(diào)劑
已經(jīng)有5人回復(fù)
-
280分求調(diào)劑 一志愿085802
已經(jīng)有7人回復(fù)
-
0854電子信息求調(diào)劑
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
263求調(diào)劑
已經(jīng)有4人回復(fù)
» 本主題相關(guān)價(jià)值貼推薦，對(duì)您同樣有幫助:
- 要合成文獻(xiàn)中的引物，但沒(méi)有表明方向，只給了右引物 和左引物不知怎么合成
已經(jīng)有5人回復(fù)
- 求助！新人，融合PCR一直融不上�。。�
已經(jīng)有24人回復(fù)
- 求AS_PCR引物設(shè)計(jì)
已經(jīng)有4人回復(fù)
- 融合PCR請(qǐng)幫忙看看圖片吧
已經(jīng)有6人回復(fù)
- Touch Down PCR
已經(jīng)有17人回復(fù)
- 合成的引物直接退火形成粘性末端后連入載體
已經(jīng)有13人回復(fù)
- 如何避免引物二聚體
已經(jīng)有10人回復(fù)
- 3個(gè)片段的重疊延伸pcr,pcr反應(yīng)條件？
已經(jīng)有7人回復(fù)
- 重疊PCR引物，兩個(gè)片段分別回收后存在雜帶是怎么回事
已經(jīng)有4人回復(fù)
- 求關(guān)于Overlap PCR(重疊延伸PCR)的具體實(shí)驗(yàn)過(guò)程及原理
已經(jīng)有10人回復(fù)
- 求問(wèn)一個(gè)問(wèn)題，dNTP濃度過(guò)低是否在PCR反應(yīng)中就會(huì)形成引物二聚體 謝謝
已經(jīng)有5人回復(fù)
- 求助重疊延伸pcr
已經(jīng)有5人回復(fù)
- 3個(gè)片段的重疊pcr能否一步到位？
已經(jīng)有11人回復(fù)
- 關(guān)于融合PCR的問(wèn)題
已經(jīng)有14人回復(fù)
- 合成一段DNA的問(wèn)題？引物，PCR
已經(jīng)有13人回復(fù)
- 重疊延伸PCR設(shè)計(jì)引物
已經(jīng)有3人回復(fù)
- PCR最短可以P多少bp，求大家?guī)臀以O(shè)計(jì)引物！
已經(jīng)有7人回復(fù)
- 【求助/交流】引物合成
已經(jīng)有17人回復(fù)
- 【求助/交流】引物Tm值很高，PCR求助
已經(jīng)有17人回復(fù)
- 【求助/交流】qrt-pcr引物是否要純化
已經(jīng)有4人回復(fù)
- 【求助/交流】PCR延伸問(wèn)題
已經(jīng)有12人回復(fù)
- 【求助/交流】PCR引物可否不用設(shè)計(jì)直接用參考文獻(xiàn)中的？
已經(jīng)有7人回復(fù)
imyting
至尊木蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)
- BioEPI: 1
- 應(yīng)助: 66 (初中生)
- 金幣: 10218.2
- 散金: 658
- 紅花: 5
- 帖子: 805
- 在線: 167.6小時(shí)
- 蟲(chóng)號(hào): 736362
- 注冊(cè): 2009-03-31
- 性別: GG
- 專(zhuān)業(yè): 生物大分子結(jié)構(gòu)與功能
4樓2012-03-24 15:14:51
顏英
銅蟲(chóng) (小有名氣)
- 應(yīng)助: 10 (幼兒園)
- 金幣: 9.3
- 散金: 14
- 帖子: 95
- 在線: 26.5小時(shí)
- 蟲(chóng)號(hào): 1713517
- 注冊(cè): 2012-03-24
- 專(zhuān)業(yè): 微生物生理與生物化學(xué)
2樓2012-03-24 13:17:14
小周
鐵桿木蟲(chóng) (著名寫(xiě)手)
- BioEPI: 2
- 應(yīng)助: 42 (小學(xué)生)
- 金幣: 11329.6
- 散金: 20
- 紅花: 10
- 沙發(fā): 1
- 帖子: 1324
- 在線: 560.7小時(shí)
- 蟲(chóng)號(hào): 688224
- 注冊(cè): 2009-01-05
- 性別: MM
- 專(zhuān)業(yè): 抗體工程學(xué)
3樓2012-03-24 14:57:01
lvbobo823
鐵桿木蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)
- BioEPI: 1
- 應(yīng)助: 363 (碩士)
- 金幣: 7753.3
- 散金: 15
- 紅花: 9
- 帖子: 751
- 在線: 189.4小時(shí)
- 蟲(chóng)號(hào): 819723
- 注冊(cè): 2009-07-31
- 性別: GG
- 專(zhuān)業(yè): 植物遺傳學(xué)
【答案】應(yīng)助回帖
★ ★ ★ ★ ★ ★
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
telomerase: 金幣+1, 謝謝你的熱心應(yīng)助 2012-03-24 20:36:38
小周: 金幣+5, ★★★很有幫助 2012-03-26 17:08:10
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
telomerase: 金幣+1, 謝謝你的熱心應(yīng)助 2012-03-24 20:36:38
小周: 金幣+5, ★★★很有幫助 2012-03-26 17:08:10
|
就是搭橋PCR。設(shè)計(jì)引物時(shí)A片段3‘端取20bp左右的堿基，B片段5’端取20個(gè)堿基左右，總堿基不要超過(guò)50bp（大于50公司合成會(huì)比較貴），同時(shí)合成該引物反向互補(bǔ)片段。 用這條引物跟B片段的反向引物擴(kuò)增B片段。再用這條引物反向互補(bǔ)序列為反向引物與A片段的正向引物擴(kuò)增A片段。 把上一步擴(kuò)增的A，B產(chǎn)物等摩爾混合再用A片段的正向引物與B片段的反向引物擴(kuò)增，跑膠，回收你需要的大小的片段。 |
5樓2012-03-24 16:16:08
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 280分求調(diào)劑 一志愿085802 +4 | PUMPT 2026-03-22 | 7/350 |
|
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 材料與化工085600，總分304，本科有兩篇sci參與，求調(diào)劑 +4 | 幸運(yùn)的醬醬 2026-03-22 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 招08考數(shù)學(xué) +4 | laoshidan 2026-03-20 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 一志愿上海交大生物與醫(yī)藥專(zhuān)碩324分，求調(diào)劑 +3 | jiajunX 2026-03-22 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 尋找調(diào)劑 +4 | 倔強(qiáng)芒? 2026-03-21 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 275求調(diào)劑 +6 | shansx 2026-03-22 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 材料學(xué)碩301分求調(diào)劑 +7 | Liyouyumairs 2026-03-21 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 材料求調(diào)劑 +5 | @taotao 2026-03-21 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 材料工程專(zhuān)碩 348分求調(diào)劑 +3 | 冬辭. 2026-03-17 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 332求調(diào)劑 +4 | ydfyh 2026-03-17 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 一志愿西南交大，求調(diào)劑 +5 | 材化逐夢(mèng)人 2026-03-18 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 材料專(zhuān)業(yè)求調(diào)劑 +6 | hanamiko 2026-03-18 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 22408 344分 求調(diào)劑 一志愿 華電計(jì)算機(jī)技術(shù) +4 | solanXXX 2026-03-20 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 材料專(zhuān)碩英一數(shù)二306 +7 | z1z2z3879 2026-03-18 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 304求調(diào)劑 +7 | 司空. 2026-03-18 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 材料學(xué)碩297已過(guò)四六級(jí)求調(diào)劑推薦 +11 | adaie 2026-03-19 | 11/550 |
|
|
|
[考研] 求調(diào)劑 +3 | eation27 2026-03-20 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 生物學(xué)調(diào)劑招人�。�！ +3 | 山海天嵐 2026-03-17 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 0703化學(xué)調(diào)劑 +3 | 妮妮ninicgb 2026-03-17 | 3/150 |
|
|
|
[碩博家園] 湖北工業(yè)大學(xué) 生命科學(xué)與健康學(xué)院-課題組招收2026級(jí)食品/生物方向碩士 +3 | 1喜春8 2026-03-17 | 5/250 |
|