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基因引物與內(nèi)參引物
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做qRT-PCR時(shí),1.目的基因引物是25base,根據(jù)估計(jì)是191bp,試用于做qRT-PCR不?2.內(nèi)參引物選擇20base的B-actin與選擇25base的GAPDH,影響不?現(xiàn)在已經(jīng)買了20base的B-actin,不知道能用不? 謝謝 |
鐵桿木蟲 (職業(yè)作家)

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木蟲 (小有名氣)
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1、內(nèi)參選擇actin與gapdh沒啥區(qū)別,housekeeper嘛 2、想看引物合格與否,首先要看反應(yīng)條件是否一致、引物擴(kuò)增條帶是否特異單一且無引物二聚體,其次是看其擴(kuò)增效率。 3、磨刀不誤砍柴工?礃侵饕陨系幕卮,發(fā)現(xiàn),樓主對(duì)PCR的原理了解的很少。不如先花點(diǎn)時(shí)間弄明白PCR,以及在此基礎(chǔ)上的real-time PCR |
鐵桿木蟲 (職業(yè)作家)
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