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2012continue新蟲 (小有名氣)
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[交流]
定量PCR目的基因與內(nèi)參的Ct值差異大怎么解決 已有2人參與
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定量PCR： 問(wèn)題1：內(nèi)參240bp，基因140bp，有必要再重新設(shè)計(jì)內(nèi)參引物嗎？ 2：目的基因與內(nèi)參的Ct值差異大。內(nèi)參17-25，目的基因28-35。需要調(diào)整模板濃度嗎？可不可以把內(nèi)參模板稀釋，而目的基因模板不稀釋。 3：擴(kuò)增效率。內(nèi)參標(biāo)準(zhǔn)曲線好做，240bp擴(kuò)增效率接近100%。但是目的基因的擴(kuò)增效率不好做，表達(dá)量比較低，表達(dá)量最高的組織Ct都有28,，標(biāo)準(zhǔn)曲線做得好不好跟起始濃度應(yīng)該有關(guān)系吧。 謝謝！ |
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銅蟲 (正式寫手)
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2樓2013-11-11 21:24:08
liu2883508
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3樓2013-11-12 11:23:53
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