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桃之夭夭pFly新蟲 (初入文壇)
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實(shí)時(shí)熒光定量 相同基因不同處理?xiàng)l件下的相對(duì)定量
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第一次接觸，自己也看了很多資料，依然有點(diǎn)糊涂，希望各位能人予以指點(diǎn)啊~在此先謝過了！ 目的：看一個(gè)基因在脅迫條件下表達(dá)量的變化。 實(shí)驗(yàn)樣本：一株植物脅迫0,1,2,3,4,5,6h后取材 已選定目的基因和內(nèi)參基因，Tm值和產(chǎn)物長度類似 疑問：1、在確定目的基因和內(nèi)參基因擴(kuò)增效率是否一致時(shí)，每個(gè)時(shí)期的樣本均需要做，還是只選擇一個(gè)時(shí)期的做就可以？ 2、在設(shè)置稀釋梯度時(shí)，同一梯度的樣本副本，是采用同一時(shí)期不同花朵所提RNA，還是同一花朵所提RNA的分裝？ 3、擴(kuò)增效率是不是來篩選最佳的反應(yīng)條件的，只要是篩選到合適的，正式試驗(yàn)的時(shí)候就不需要稀釋成各個(gè)梯度來做，直接以各個(gè)處理時(shí)期的樣本來擴(kuò)增內(nèi)參、目的基因就可以了~？ 謝謝~ |
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