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[求助]
反轉(zhuǎn)錄后用cDNA做模板擴(kuò)不出目的基因怎么辦？？？
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各位大俠急急求助�。� 最近小女子做分子實(shí)驗(yàn)頗為不順！擴(kuò)出來(lái)一個(gè)1800多的CDS全長(zhǎng)，之后提RNA反轉(zhuǎn)錄后用CDNA當(dāng)模板擴(kuò)增，咋擴(kuò)都得不到目的片段，程序和之前擴(kuò)基因組的是一樣的，但是之前一直是好好的很漂亮的帶，只是LATaq酶擴(kuò)的時(shí)候會(huì)出現(xiàn)一條弱的500bp左右片段，現(xiàn)在反轉(zhuǎn)錄后可以得到這個(gè)非特異的500bp片段，就是沒(méi)有1800多的，提高退火溫度也不行，提高1度后就什么帶都沒(méi)了！折磨死我了！ 求神人幫助！萬(wàn)分感謝！ |
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2013-01-15 16:54:41, 1.69 M
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科研屌絲007
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